【摘 要】
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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome PRRS)首次在美国报道,其主要特征是引起母猪繁殖障碍和仔猪及生长猪出现呼吸系统疾病,给世界养猪业造成
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;
【基金项目】
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国家973计划资助项目(G1999011902)。
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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome PRRS)首次在美国报道,其主要特征是引起母猪繁殖障碍和仔猪及生长猪出现呼吸系统疾病,给世界养猪业造成巨大的损失.其病原体PRRSV属于尼多病毒日,动脉炎病毒科,动脉炎病毒属。PRRSV主要感染免疫细胞如猪肺泡巨噬细胞,而且具有抗体依赖性增强作用(ADE)感染的特性。北美洲型和欧洲型分离株的基因型和抗原性不同抗原性不同,因此采用常规方法制备的疫苗不能解决其安全性以及免疫效力的问题。PRRSV包含六种结构蛋白,分别命名为GP2,GP3,GP4,GP5,M蛋白和N蛋白,GP5蛋白由ORF5编码,是主要的主要囊膜蛋白,可以诱发中和抗体,在抗病毒感染中起重要的作用.N蛋白,由ORF7编码,是病毒的核衣壳蛋白,可能编码病毒的主要的T细胞表位,对于诱发抗病毒细胞免疫非常重要。采用编码GP5蛋白与N蛋白的DNA疫苗免疫可以在体内抑制病毒的复制,但是并不能完全的抑制病毒血症。细胞因子在抗病毒中起着采用重要的作用,细胞因子可以提高常规疫苗以及基因工程疫苗的免疫效果。在本研究中,构建了五个基因双表达质粒,其中包括包含ORF5和ORF7,ORF5和IFNγ,ORF7和IFNγ,ORF5和IL-2,ORF7和IL-2,以该疫苗分组对猪进行免疫,进行抗体检测,并且以流式细胞技术检测了外周血中CD4+and CD8+T细胞亚型的变化规律。在重组质粒对猪进行免疫之后可以检测到抗N蛋白与GP5的抗体,在强毒攻击之后,感染猪(包括DNA疫苗免疫猪和对照都有不同)都有不同程度的变化,虽然免疫组病毒血症没有完全被抑制,但是和对照组比较,PRRSV的分布被限制在某些固定的组织,综合所有的结果,细胞因子IFNγ和IL-2可以提高ORF5和ORF7基因免疫的效果。
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