【摘 要】
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本研究以八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase,PDS)基因和查尔酮合酶(Chalcone synthase,CHS)基因为报告基因,以烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)为载体建立基于
【机 构】
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华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室; 武汉农尚环境股份有限公司;
【基金项目】
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教育部博士点基金项目(20130146110022);华中农业大学自主创新项目(2013PY088);校自主创新“园艺文化”项目(2014PY067);黄冈师范学院项目“大别山特色花卉资源”研究(2015TD02)
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本研究以八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase,PDS)基因和查尔酮合酶(Chalcone synthase,CHS)基因为报告基因,以烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)为载体建立基于病毒介导的观赏花烟草(Nicotiana sanderae)基因沉默体系(Virus-induced gene silencing,VIGS)。结果表明,根吸收法不适用于观赏花烟草的基因沉默体系,而利用叶背注射渗透法对观赏花烟草进行基因沉默的效果较好。在叶背注射渗透法中,用PDS基因作为报告基因时,处理组植株在全黑暗条件下培养1天后进行常规养护,25天后80%植株表现出叶片光漂白现象。在用花青素合成代谢路径上关键基因CHS作为报告基因时,60%的植株在开花后表现出预期花冠褪红斑白的现象,半定量RT-PCR结果显示被沉默植株的CHS基因表达量明显下调,观赏花烟草内源CHS基因被有效沉默。综上所述,本研究初步建立了观赏花烟草VIGS体系。
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