将携带鸡柔嫩艾美耳球虫5401基因的真核表达质粒pcDNA3-5401的减毒沙门氏菌ZJ(?)菌株口服接种3日龄非免疫鸡,二周后加强免疫一次,实验过程中未见免疫鸡死亡和异常反应。一免后6周各组鸡的体重无统计学差异(P>0.05),同时肝脏和脾脏已检测不到沙门氏菌;一免后第4周将安全性试验中剖取的肝、脾和粪便,用0.01M 灭菌PBS 稀释匀浆后,接种于含有Amp 的胆硫琼脂平板培养基中,37℃过夜培养,分别挑取单菌落,接种于含有Amp 的LB 液体培养基中,37℃,250rpm 振荡培养过夜,用碱裂解法抽提质粒,进行酶切分析和PCR 鉴定。将重组ZJlll/pcDNA3-5401菌株接种于含有Amp 的LB 平板上,连续传15代(每代37℃培养18-24h),用上述同样方法进行酶切分析和PCR 鉴定,以观察质粒在体外培养基上传代的稳定性。结果表明,体内试验和体外培养的重组质粒在受体菌ZJlll 菌株内比较稳定。试验提示,利用减毒沙门氏菌为载体传递DNA 疫苗具有良好的安全性和稳定性。