五种不同阴离子交换柱分离纯化MRJP1的研究

来源 :第十届海峡两岸蜜蜂与蜂产品学术研讨会暨首届全国蜂产业高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wwb158
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利用阴离子交换层析,对蜂王浆主蛋白(Major Royal Jelly Proteins,MRJPs)进行分离纯化.本实验使用了五种阴离子交换柱(GigaCap Q-650M、Q-600C AR、DEAE-650M、SuperQ-650M和QAE-550C),分别在不同pH值(8.0,9.0,10.0)和不同浓度(10 mmol/L,20 mmol/L,30 mmol/L)的Tfis-HCl缓冲液下进行蛋白分离,从而优化出最佳洗脱条件,并筛选出分离效果最佳的阴离子交换柱.然后通过SDS-PAGE对收集的组分进行检测,再采用MALDI-TOF-MS来鉴定得到的单一蛋白组分.结果表明:最佳洗脱条件为使用pH 9.0,30 mmol/L Tris-HC1,0~500mmol/L NaCl的缓冲液进行线性洗脱;5种不同的阴离子交换柱均能分离纯化出蜂王浆蛋白1(MRJPl);其中,GigaCap Q-650M柱分离效果最佳,Q-600C AR最差.
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