【摘 要】
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建立了一种快速检测Ⅱ型猪链球菌(Streptococcus suis)的多重荧光PCR(multiplex real-time polymerase chin reaction)方法.首先,从GenBank中获得Ⅱ型猪链球菌荚膜抗原编码基
【机 构】
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珠海出入境检验检疫局,华南农业大学,山西农业大学
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建立了一种快速检测Ⅱ型猪链球菌(Streptococcus suis)的多重荧光PCR(multiplex real-time polymerase chin reaction)方法.首先,从GenBank中获得Ⅱ型猪链球菌荚膜抗原编码基因簇中的cps2I和溶菌素释放蛋白基因mrp,用Primer Express 2.0设计引物和Taqman荧光探针,在ABI7500荧光PCR仪上进行荧光PCR检测.荧光曲线表明该多重荧光PCR可以特异性地检测Ⅱ型猪链球菌,而参考猪链球菌、大肠杆菌等细菌和空白对照均为阴性;检测方法灵敏度达10个细菌的最小检测量,整个过程仅需60 min;稳定性试验表明,2次检测所得的Ct值之间无统计学差异(P＞0.05).本试验建立的多重荧光PCR检测Ⅱ型猪链球菌的方法快速、特异性强,灵敏度高,稳定性好,适合于大批量样品的检验,可广泛用于出入境检疫和动物防疫监督部门的疫情监测.
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