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目的
研究阿里红粗多糖(FOPS)及其纯化组分(FOPS-a)对RAW264.7巨噬细胞MAPK(mitogen-activated protein kinases)信号途径的影响。
方法不同浓度(50、100、200 μg/ml)的FOPS及FOPS-a干预RAW264.7巨噬细胞24 h，采用RT-qPCR法和Western blot法检测MAPK信号通路中p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases，p38 MAPK)、胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun NH2-terminal kinase，JNK)的mRNA表达和相应磷酸化蛋白质含量；加入MAPK特异性抑制剂(PD98059、SP600125、SB203580)后，Western blot法检测上述蛋白质的磷酸化水平，ELISA法检测巨噬细胞的TNF-α分泌量。
结果与空白对照组相比，不同浓度的FOPS及FOPS-a可以显著提高p38、ERK mRNA表达量及其磷酸化蛋白质的含量(P<0.05)；3种抑制剂均能显著降低FOPS及FOPS-a诱导的ERK1/2、p38蛋白磷酸化以及TNF-α分泌量的增加(P<0.05)。
结论FOPS及FOPS-a可以活化ERK1/2、p38 MAPK信号转导通路而参与RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。