【摘 要】
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本研究旨在构建稳定表达TFEB-GFP的HeLa细胞系,并利用其筛选促进转录因子EB(TFEB)入核药物.利用分子生物学技术成功构建了重组表达载体pLVX-AcGFP1-N1-TFEB,并进行慢病毒包装
【机 构】
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天津科技大学生物工程学院,内蒙古医科大学基础医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31471335)
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本研究旨在构建稳定表达TFEB-GFP的HeLa细胞系,并利用其筛选促进转录因子EB(TFEB)入核药物.利用分子生物学技术成功构建了重组表达载体pLVX-AcGFP1-N1-TFEB,并进行慢病毒包装,进而侵染HeLa细胞,通过嘌呤霉素筛选阳性单克隆细胞株.采用荧光显微镜技术及免疫印迹技术(Western blot)证实稳定表达TFEB-GFP细胞株构建成功.利用该细胞模型筛选得到促TFEB入核药物盐酸舍曲林(Sertraline HCl),此药物能够促进转录因子TFEB靶基因的表达,并促进细胞自噬.M
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