【摘 要】
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目的:本研究通过观察c-Src在AngⅡ对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)的激活和c-Fos蛋白表达中的影响,以进一步阐明AngⅡ促VSMC增殖的细胞内信息转导机制
【基金项目】
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Foundation of National Natural Science;
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目的:本研究通过观察c-Src在AngⅡ对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)的激活和c-Fos蛋白表达中的影响,以进一步阐明AngⅡ促VSMC增殖的细胞内信息转导机制.方法:原代和传代培养SD大鼠主动脉VSMC,以脂质体包裹反义c-Src寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)转染培养的VSMC以抑制c-Src蛋白表达和激酶活性.以未转染的VSMC为对照,观察10-7mol/L AngⅡ刺激对转染的VSMC的MAPK活性和c-Fos蛋白表达的影响.蛋白免疫沉淀和酶自身磷酸化率法测定c-Src激酶活性;髓鞘碱性蛋白(MBP)底物磷酸化率测定MAPK激酶活性;Western blotting免疫印迹法测定c-Src和c-Fos蛋白表达情况.结果:转染不同浓度反义c-Src ODNs的VSMC,c-Src蛋白含量呈浓度依赖性降低,c-Src激酶活性也显著抑制,以AngⅡ刺激经转染反义c-Src ODNs的VSMC,c-Src激酶活性增幅仅为对照组的8.7%;MAPK活性仅为对照的1.6%:c-Fos蛋白表达的增幅为对照组的30.0%.结论:AngⅡ可诱导VSMC c-Src激活和细胞内信息转导,且AngⅡ引起的MAPK和c-fos的激活依赖于c-Src的激活,提示c-Src是AngⅡ促血管平滑肌细胞增殖的重要信息分子.
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