目的获得具有较好致瘤性、在动物体内保留表达外源基因MUC1 VNTR(mucin1,variable number tandemrepeats)能力的稳定转染细胞株B16-GFP-MUC1,供MUC1靶向药物研究中体内抑瘤实验所用到的肿瘤模型。方法用脂质体转染的方法和有限稀释法获得单克隆细胞株;将该细胞株进行体内传代后,流式分选GFP阳性细胞群,并对分选后细胞用有限稀释法进行单克隆化。用流式细胞仪和共聚焦荧光显微镜观察各时期细胞克隆的GFP表达情况。结果脂质体转染方法得到的在G418压力选择下存在的细胞B16-1,其GFP阳性细胞比率最高为80%左右;致瘤性较差,75d内仅87.5%小鼠出瘤;体外的稳定性观察中,在无抗生素的培养液中观察5周,其阳性率降至20%左右;经过体内接种后仅有10%左右的肿瘤细胞保留了外源基因的表达。而经过体内传代和流式分选后得到的单克隆细胞群B16-39,其GFP阳性细胞比率>90%;致瘤性为20d内100%小鼠出瘤;体外培养8周,GFP阳性的细胞比率>90%;体内剥离后的肿瘤细胞的GFP阳性细胞比率均>90%。结论对于用于体内动物模型的稳定转染细胞,通过体内传代,流式分选并单克隆化,是获得致瘤性好,体内体外较为稳定的稳定转染细胞株的一个可行方案。