【摘 要】
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目的:调查TLR家族中哪种TLR受体的配体依赖性激活可引起胃癌细胞的代谢重编程.方法:通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹(WB)在一组人GC细胞中测量TLR家族成员的表达.通过进行Seahorse生物能测定以及测量L-乳酸和活性氧(ROS)的产生,确定激动剂对不同TLR(TLR2、4、9)诱导的人GC细胞的代谢变化;通过RT-qPCR在被刺激的GC细胞中分析了涉及氧化磷酸化和糖酵解的基因的表达;通过Western印迹表征SOD2的表达.结果:由合成分子或全病原体抗原激活的TLR2信号传导
【机 构】
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上海交通大学医学院附属上海市第一人民医院普外科 上海201620;上海交通大学医学院附属上海市第一人民医院普外科 上海201620;哈德逊医学研究所先天免疫与传染病中心莫纳什大学临床科学学院分子转化科
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目的:调查TLR家族中哪种TLR受体的配体依赖性激活可引起胃癌细胞的代谢重编程.方法:通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹(WB)在一组人GC细胞中测量TLR家族成员的表达.通过进行Seahorse生物能测定以及测量L-乳酸和活性氧(ROS)的产生,确定激动剂对不同TLR(TLR2、4、9)诱导的人GC细胞的代谢变化;通过RT-qPCR在被刺激的GC细胞中分析了涉及氧化磷酸化和糖酵解的基因的表达;通过Western印迹表征SOD2的表达.结果:由合成分子或全病原体抗原激活的TLR2信号传导增强了胃癌细胞中高表达TLR2的细胞株的糖酵解活性和线粒体呼吸,而配体诱导的TLR4和TLR9活化抑制了线粒体呼吸或细胞外酸化率.同时,涉及葡萄糖代谢和氧化还原系统调节的基因,例如HIF1A,PFKFB3和SOD2,在TLRs下游被上调.结论:由配体诱导的特定TLRs的激活介导了人类GC细胞中不同的代谢表型.TLR2是唯一同时促进OXPHOS和糖酵解的家族成员,这可能导致肿瘤进展.
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