摘要：以玉米自交系郑58基因组DNA为模板，设计了2对特异性引物，分别PCR扩增玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）启动子及其全长编码序列，利用In-Fusion技术将两者定向克隆到载体pCAMBIA-1391Z上，并对重组子进行测序验证。结果表明，该PEPC启动子序列与GenBank中的玉米自交系B73的同源性为97.70%，片段长1200bp；全长编码序列同源性为97.90%，片段长6330bp。通过HindⅢ和EcoRⅠ酶切载体pCAMBIA-1391Z，利用In-Fusion技术将线性载体与之前获得的2个PCR片段连接，测序结果与预期序列一致，表明成功构建了pCAMBIA-1391Z-PEPC植物表达载体。对克隆和载体构建中存在的问题进行了讨论，以期为该类型基因的高效克隆及表达载体的构建提供参考、为C4型PEPC基因功能研究和C3植物遗传转化提供可用的基因序列。 全文查看链接 　　1.5植物表达载体的构建 全文查看链接 　　[7]BlsingOE，ErnstK，StreubelM，etal.Thenon-photosyntheticphosphoenolpyruvatecarboxylasesoftheC4dicotFlaveriatrinervia—implicationsfortheevolutionofC4photosynthesis[J].Planta，2002，215（3）：448-456. 全文查看链接