【摘 要】
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建立了一种核苷磷酸化酶酶活的检测方法,解决了工业化磷酸化酶质量无法判定的难题。建立核苷磷酸化酶的反应体系,以10 g/L肌苷、10 g/L三聚磷酸钠为底物,最适反应温度40℃,pH
【机 构】
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通辽梅花生物科技有限公司,廊坊梅花生物技术开发有限公司
【基金项目】
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河北省氨基酸工程技术研究中心创新平台建设资助项目(131000021)。
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建立了一种核苷磷酸化酶酶活的检测方法,解决了工业化磷酸化酶质量无法判定的难题。建立核苷磷酸化酶的反应体系,以10 g/L肌苷、10 g/L三聚磷酸钠为底物,最适反应温度40℃,pH 4.5,反应10 min,使肌苷在磷酸化酶的作用下生成肌苷酸二钠(IMP)。通过高效液相色谱法(HPLC)测定IMP的生成量,液相色谱条件:采用C18色谱柱,以0.02 mol/L磷酸二氢钾∶乙腈为99.5∶0.5(V/V)为流动相,1 mL/min等度洗脱,40℃,紫外检测器(λ=254 nm),进样量2μL。此方法测定结果
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