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【摘要】 本文将对三叶香茶菜的化学成分和保肝药理作用的研究进展进行综述。
【关键词】 三叶香茶菜 化学研究 保肝药理作用
三叶香茶菜为唇形科植物牛尾草Rabdosia ternifolia(D.Don) Hara [Plectranthus ternifolius(D.Don);Isodon ternifolius(D.Don)kudo]的全草或叶，其别名为：牛尾草（云南麻栗坡），四楞草、龙胆草（云南广南），鸭边窝（云南莲山）,扫帚(云南耿马)三叶扫把,常沙、牛尾巴蒿（云南思茅），马鹿尾（云南镇康，龙陵），三叉金（广西平南），三姐妹、三托艾、伤寒头（广西），虫芽药、兽药（贵州兴义）。全草入药，治痢疾肠炎，黄疸性肝炎，烟喉炎，扁桃腺炎，尿道感染，膀胱炎，急性肾炎，肿胀疼痛，流感，毒蛇咬伤，牙痛等。产于云南南部、西南部及东南部，贵州南部，广西及广东[1]。目前该药在临床运用多是用于保肝作用，本文将对三叶香茶菜的化学成分和保肝药理作用进行综述。
1化学研究
1.1化学成分
有关三叶香茶菜的化学成分研究也一些报道。像王智民[2]用95％乙醇提取牛尾草的全草，用热EtOAc转溶，回收乙酸乙酯， 得到浸膏用EtOAc溶解，依次用5％NaOH、饱和Na2CO3溶液和水萃取， 乙酸乙醇层用无水Na2 CO3干燥，过滤，回收溶剂，得浸膏，经反复硅胶柱层析分离，得到以下结晶：牛尾草甲素、6-甲基三十二烷、谷甾醇、为齐墩果酸、乌苏酸、牛尾草乙素、齐墩果酸、细叶香茶菜甲素、细叶香茶菜乙素、胡萝甙。其中牛尾草甲素结构为6β,11α,15β-triacetoxy-7β-hydroxy-7α,20-epoxy-entkaur-16-ene， 牛尾乙素结构为1lα-acetoxy-6β，7β，15β-trihydroxy-7α，20- epoxy-enrkaur-16-ene。此外，国外研究者Lu GH[3]从三叶香茶菜的干叶的丙酮提取物中分离到一不饱和内酯化合物——10表奥尔古素，为无色针状结晶，分子式为C18H22O9。另外，纳智[4]等：从牛尾草的地上部分分离得到一个新的对映一贝壳杉烷型二萜，命名为牛尾草素，同时还分离得到 5个已知的对映一贝壳杉垸型二萜化台物，分别为香茶菜醛、长管香茶菜素、开展香茶菜素E，及术樨草素，芹菜素、α一香树脂醇、乌索酸和 2α一羟基乌索酸。纳智还从香茶菜地上部分分离出新的对映-贝壳杉烷二萜化台物，即细叶香茶菜甲素（3β，6α，15β-trihydraxy-1α,7β-diacetoxy-11β,16β-epoxy-ent-kaurance）和细叶香茶菜乙素(1α,6α,11β-trihydroxy-3β,7β-diacetoxy-ent-kaur-16-en-15-one)[5]。
1.2成分含量测定
有相关文献报道测定三叶香茶菜的成分的，主要其中在测定齐墩果酸和熊果酸含量。吴柳春[6]等人采用高效液相色譜一蒸发光散射检测器，以齐墩果酸和熊果酸为指标成分， 色谱柱为Agilent Ecli pse XDB—C18(4.6 mm×250mm，5m)，流动相为甲醇一 0.5％醋酸铵( 82：18 )，流速1.0 mL／min ，柱温30℃，蒸发光散射检测器漂移管温度85℃，雾化气体流量2.0L／min，结果测得齐墩果酸在0.45～ 2.69g(r=0.9999 )、熊果酸在0.63～3.75g(r=0.9993)的范围内具有良好的线性关系； 平均回收率齐墩果酸为 100.3％( RSD=1.32 ％)，熊果酸为100.6 ％(RSD=1.66％)，实验还发现用原标准方法测定齐墩果酸含量时，与采用高效液相色谱一蒸发光散射检测器法测定的结果均高出3倍左右，原因是齐墩果酸和熊果酸两种成分在原标准方法中无法分离，扫描峰面积时将相同颜色的斑点面积带入结果， 实际检出的是两种成分的混合含量；原标准法操作繁琐，重现性差、 准确度不高。另外吴柳春还测不同产地、不同药用部位的三姐妹药材的齐墩果酸和熊果酸的含量，得知三姐妹主要活性成分存在于花、 花序、嫩枝、叶、茎等部位，根及老茎含量甚少，还得知含测齐墩果酸时用乙醚为提取溶剂结果较好[7]。此外，罗朝晖[8]用高效液相色谱法测定三叶香茶菜中齐墩果酸的含量，色谱条件：色谱柱ZORBAXXDB –C18 ( 4.6 mm×250mm,5μm)， 流动相是甲醇-水(90：10 )， 检测波长215 nm，流速1.0ml／min，柱温是30℃，结果齐墩果酸线性范围为0.462～ 4．6 2g(r=0.999 5 )，加样回收率为100.25％，RSD为1.35％，实验者从结果知道三叶香茶菜中齐墩果酸的含量较低。李艳苓[9]等人用高效液相色谱法测定三叶香茶菜中齐墩果酸含量，利用的色谱条件是：HpersilC18分析柱(4.6mm×250mm),流动相是甲醇 -0.1%磷酸水（80：20），柱温22℃，流速1ml/min,检测波长207nm,进样量20μl, 结果表明齐墩果酸在0.175-7μg之间呈线性关系, 平均回收率为98.91%,RSD为1.886%。陈勇[10]等人HPLC法证实了野生与家种药材中齐墩果酸和熊果酸的含量无明显差异(齐墩果酸含0.26～0.30％；熊果酸含量0.36～0.43％)，还证实了超声提取法测得的齐墩果酸和熊果酸含量较高，且超声提取方法简便。
2保肝作用
2.1保肝药理作用方面
王勤[11]等实验研究发现复方三姐妹片对体外温孵血清谷丙转氨酶活力及正常小鼠谷丙转氨酶活力均无明显影响，说明复方三姐妹片并不是直接抑制谷丙转氨酶活力的结果；研究还发现了复方三姐妹片对扑热息痛和氢化泼尼松引起的小鼠谷丙转氨酶升高无降低作用。研究还发现复方三姐妹片可降低硫代乙酰胺肝损伤小鼠血清AIT，与肝损伤对照组比较有显著差异， 而且降酶作用随给药剂量增大而增强；给药组连续灌胃复方三姐妹片(18片／千克)28天，结果对照组死亡率100％，给药组死亡率20％，解剖对照组小鼠，观察可见肝脏缩小硬化， 腹水白色浑浊，量较多，解剖给药组小鼠观察可见肝脏病变程度轻， 腹水较步；复方三姐妹片有促进肝糖原生成的作用[12]。此外，王勤[13]等用三姐妹的乙醇提取物、己醇提取物的5% 盐酸可溶性组分和5%盐酸可溶性组分中萃取出来的乙酸乙酯可溶性组分给小鼠灌胃给药，剂量是150g/kg，结果表明前两者均可降 低 CCL4所致急性肝损伤小鼠的ALT活性，与肝损伤对照组比较有显著性差异，而最后者无效，提示三姐妹的保肝活性成分可能是水、醇可溶性成分，而不是脂溶性较高的成分。实验还发现家种三叶香茶菜水提物能明显抑制CC14小鼠急性肝损伤及 BCG+LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤血清ALT活力和MDA含量， 明显提高小鼠血清T-SOD活力[14]。汪谦[15]等用复方三叶香茶菜做抗大鼠肝纤维化的实验研究，采用腹腔注射CCL4致大鼠肝纤维化模型，运用苏木精-伊红染色、Massion染色检测肝纤维化的变化，生化检测肝脏羟脯氨酸、血清丙氨基转移酶及天冬氨酸转移酶，用免疫组织化学法观察а-平滑肌肌动蛋白的表达，分别用 RT-PCR和Western bolt法检测对转化生长因子β1及结缔组织成长组织mRNA和蛋白质表达的影响，实验结果发现复方三叶香茶菜能显著改善CCL4诱导的肝纤维化程度，肝组织羟脯氨酸含量显著降低，血清ALT和AST含量明显降低肝纤维化模型组，肝组织对转化生长因子及结缔组织生长因子的mRNA和蛋白质表达均明显下降，提示了复方三叶香茶菜对实验性大鼠肝纤维化的预防作用机制可能与对转移生长因子β1和结缔生长因子的表达有关。
2.2保肝临床作用方面
李睿[16]等用复方三叶香荼莱片治疗慢性乙型肝炎98例， 比较治疗前后其ALT，HBV-DNA拷贝值，结果治疗后患者 A L T复常和( 或) HBV，DNA转阴者占62.24％； 血清ALT治疗前后差别显著。李淑平[17]等观察复方三姐妹片治疗慢性乙型肝炎和乙肝病毒携带者308例时得出结果：HBsAg转阴率为32.8%，滴度下降率为39.6%，HBeAg转阴率为58.6%，抗一HBe转阳率为69.2%，与对照组比较差别有显著性；抗一HBolgG转阴率为20.9%，抗一HBs转阳率为9.3%，与对照组比较无差别。此外，李淑平等还观察复方三叶香茶菜片治疗慢性乙型肝炎50例,与用齐墩果酸片30例作对照观察，结果得出结果所示,两组患者治疗后症状与体征均有不同程度改善,差别不显著；两组患者肝功能异常指标,组内治疗前、后比较,差异非常显著,认为两组都有较好的降转氨酶作用；两组间治疗后ALT, AST, GGT和A/ G等指标比较,差别无显著性；而总胆汁酸,总胆红素指标比较,差别有显著性, 复方三叶香茶菜片改善总胆汁酸和总胆红素的疗效优于齐墩果酸片[18]。周培郁[19]等用复方三姐妹片治疗慢性乙型肝炎24例,与用益肝灵治疗的22例作对照,治疗后随访1年，结果治疗组治疗结束时和1年后有效率分别为83.3%和95.8%，HbeAg，HBV-DNA阴转率分别为50.0%，58.3%，均显著高于对照组，治疗组治疗结束时ALT和A/G的复常率分别为91.7%和72.7%，1年后则分别为100%和95.8%，均高于对照组，提示了复方三姐妹片远期疗效优于近期疗效。
3结语
本文只对三叶香茶菜的化学成分和保肝作用进行综述，至于三叶香茶菜的其它具有药用价值的方面有待于研究开发。但是从目前的研究情况看，对三叶香茶菜的保肝作用研究还不是很完善，比如保肝作用的活性成分还未明确，这方面有待于进一步研究。
参考文献
[1] 中国植物志[s].436-437
[2] 王智民，冯浩，梁晓天，等. 虫牙药的化学成分研究[J]. 药学学报. 1996，31(10)：764-769.
[3] Lu GH.從三叶香茶菜分得10-表奥尔古素[J].国外医学中医中药分册.1998，20（2）：52
[4] 纳智，项伟，赵勤实，等. 牛尾草中一新的对映一贝壳杉烷型二萜[J]. 云南植物研究. 2002，24(2)：267～272
[5]吴柳春，覃子龙，蒋秋香. 复方三叶香茶菜片质量标准的改进[J]. 中成药.2008，30（7）：1000-1003
作者简介：主管药师。研究方向：中草药研究。电话：13086797679。Email：mofengwei66@sina.com
【关键词】 三叶香茶菜 化学研究 保肝药理作用
三叶香茶菜为唇形科植物牛尾草Rabdosia ternifolia(D.Don) Hara [Plectranthus ternifolius(D.Don);Isodon ternifolius(D.Don)kudo]的全草或叶，其别名为：牛尾草（云南麻栗坡），四楞草、龙胆草（云南广南），鸭边窝（云南莲山）,扫帚(云南耿马)三叶扫把,常沙、牛尾巴蒿（云南思茅），马鹿尾（云南镇康，龙陵），三叉金（广西平南），三姐妹、三托艾、伤寒头（广西），虫芽药、兽药（贵州兴义）。全草入药，治痢疾肠炎，黄疸性肝炎，烟喉炎，扁桃腺炎，尿道感染，膀胱炎，急性肾炎，肿胀疼痛，流感，毒蛇咬伤，牙痛等。产于云南南部、西南部及东南部，贵州南部，广西及广东[1]。目前该药在临床运用多是用于保肝作用，本文将对三叶香茶菜的化学成分和保肝药理作用进行综述。
1化学研究
1.1化学成分
有关三叶香茶菜的化学成分研究也一些报道。像王智民[2]用95％乙醇提取牛尾草的全草，用热EtOAc转溶，回收乙酸乙酯， 得到浸膏用EtOAc溶解，依次用5％NaOH、饱和Na2CO3溶液和水萃取， 乙酸乙醇层用无水Na2 CO3干燥，过滤，回收溶剂，得浸膏，经反复硅胶柱层析分离，得到以下结晶：牛尾草甲素、6-甲基三十二烷、谷甾醇、为齐墩果酸、乌苏酸、牛尾草乙素、齐墩果酸、细叶香茶菜甲素、细叶香茶菜乙素、胡萝甙。其中牛尾草甲素结构为6β,11α,15β-triacetoxy-7β-hydroxy-7α,20-epoxy-entkaur-16-ene， 牛尾乙素结构为1lα-acetoxy-6β，7β，15β-trihydroxy-7α，20- epoxy-enrkaur-16-ene。此外，国外研究者Lu GH[3]从三叶香茶菜的干叶的丙酮提取物中分离到一不饱和内酯化合物——10表奥尔古素，为无色针状结晶，分子式为C18H22O9。另外，纳智[4]等：从牛尾草的地上部分分离得到一个新的对映一贝壳杉烷型二萜，命名为牛尾草素，同时还分离得到 5个已知的对映一贝壳杉垸型二萜化台物，分别为香茶菜醛、长管香茶菜素、开展香茶菜素E，及术樨草素，芹菜素、α一香树脂醇、乌索酸和 2α一羟基乌索酸。纳智还从香茶菜地上部分分离出新的对映-贝壳杉烷二萜化台物，即细叶香茶菜甲素（3β，6α，15β-trihydraxy-1α,7β-diacetoxy-11β,16β-epoxy-ent-kaurance）和细叶香茶菜乙素(1α,6α,11β-trihydroxy-3β,7β-diacetoxy-ent-kaur-16-en-15-one)[5]。
1.2成分含量测定
有相关文献报道测定三叶香茶菜的成分的，主要其中在测定齐墩果酸和熊果酸含量。吴柳春[6]等人采用高效液相色譜一蒸发光散射检测器，以齐墩果酸和熊果酸为指标成分， 色谱柱为Agilent Ecli pse XDB—C18(4.6 mm×250mm，5m)，流动相为甲醇一 0.5％醋酸铵( 82：18 )，流速1.0 mL／min ，柱温30℃，蒸发光散射检测器漂移管温度85℃，雾化气体流量2.0L／min，结果测得齐墩果酸在0.45～ 2.69g(r=0.9999 )、熊果酸在0.63～3.75g(r=0.9993)的范围内具有良好的线性关系； 平均回收率齐墩果酸为 100.3％( RSD=1.32 ％)，熊果酸为100.6 ％(RSD=1.66％)，实验还发现用原标准方法测定齐墩果酸含量时，与采用高效液相色谱一蒸发光散射检测器法测定的结果均高出3倍左右，原因是齐墩果酸和熊果酸两种成分在原标准方法中无法分离，扫描峰面积时将相同颜色的斑点面积带入结果， 实际检出的是两种成分的混合含量；原标准法操作繁琐，重现性差、 准确度不高。另外吴柳春还测不同产地、不同药用部位的三姐妹药材的齐墩果酸和熊果酸的含量，得知三姐妹主要活性成分存在于花、 花序、嫩枝、叶、茎等部位，根及老茎含量甚少，还得知含测齐墩果酸时用乙醚为提取溶剂结果较好[7]。此外，罗朝晖[8]用高效液相色谱法测定三叶香茶菜中齐墩果酸的含量，色谱条件：色谱柱ZORBAXXDB –C18 ( 4.6 mm×250mm,5μm)， 流动相是甲醇-水(90：10 )， 检测波长215 nm，流速1.0ml／min，柱温是30℃，结果齐墩果酸线性范围为0.462～ 4．6 2g(r=0.999 5 )，加样回收率为100.25％，RSD为1.35％，实验者从结果知道三叶香茶菜中齐墩果酸的含量较低。李艳苓[9]等人用高效液相色谱法测定三叶香茶菜中齐墩果酸含量，利用的色谱条件是：HpersilC18分析柱(4.6mm×250mm),流动相是甲醇 -0.1%磷酸水（80：20），柱温22℃，流速1ml/min,检测波长207nm,进样量20μl, 结果表明齐墩果酸在0.175-7μg之间呈线性关系, 平均回收率为98.91%,RSD为1.886%。陈勇[10]等人HPLC法证实了野生与家种药材中齐墩果酸和熊果酸的含量无明显差异(齐墩果酸含0.26～0.30％；熊果酸含量0.36～0.43％)，还证实了超声提取法测得的齐墩果酸和熊果酸含量较高，且超声提取方法简便。
2保肝作用
2.1保肝药理作用方面
王勤[11]等实验研究发现复方三姐妹片对体外温孵血清谷丙转氨酶活力及正常小鼠谷丙转氨酶活力均无明显影响，说明复方三姐妹片并不是直接抑制谷丙转氨酶活力的结果；研究还发现了复方三姐妹片对扑热息痛和氢化泼尼松引起的小鼠谷丙转氨酶升高无降低作用。研究还发现复方三姐妹片可降低硫代乙酰胺肝损伤小鼠血清AIT，与肝损伤对照组比较有显著差异， 而且降酶作用随给药剂量增大而增强；给药组连续灌胃复方三姐妹片(18片／千克)28天，结果对照组死亡率100％，给药组死亡率20％，解剖对照组小鼠，观察可见肝脏缩小硬化， 腹水白色浑浊，量较多，解剖给药组小鼠观察可见肝脏病变程度轻， 腹水较步；复方三姐妹片有促进肝糖原生成的作用[12]。此外，王勤[13]等用三姐妹的乙醇提取物、己醇提取物的5% 盐酸可溶性组分和5%盐酸可溶性组分中萃取出来的乙酸乙酯可溶性组分给小鼠灌胃给药，剂量是150g/kg，结果表明前两者均可降 低 CCL4所致急性肝损伤小鼠的ALT活性，与肝损伤对照组比较有显著性差异，而最后者无效，提示三姐妹的保肝活性成分可能是水、醇可溶性成分，而不是脂溶性较高的成分。实验还发现家种三叶香茶菜水提物能明显抑制CC14小鼠急性肝损伤及 BCG+LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤血清ALT活力和MDA含量， 明显提高小鼠血清T-SOD活力[14]。汪谦[15]等用复方三叶香茶菜做抗大鼠肝纤维化的实验研究，采用腹腔注射CCL4致大鼠肝纤维化模型，运用苏木精-伊红染色、Massion染色检测肝纤维化的变化，生化检测肝脏羟脯氨酸、血清丙氨基转移酶及天冬氨酸转移酶，用免疫组织化学法观察а-平滑肌肌动蛋白的表达，分别用 RT-PCR和Western bolt法检测对转化生长因子β1及结缔组织成长组织mRNA和蛋白质表达的影响，实验结果发现复方三叶香茶菜能显著改善CCL4诱导的肝纤维化程度，肝组织羟脯氨酸含量显著降低，血清ALT和AST含量明显降低肝纤维化模型组，肝组织对转化生长因子及结缔组织生长因子的mRNA和蛋白质表达均明显下降，提示了复方三叶香茶菜对实验性大鼠肝纤维化的预防作用机制可能与对转移生长因子β1和结缔生长因子的表达有关。
2.2保肝临床作用方面
李睿[16]等用复方三叶香荼莱片治疗慢性乙型肝炎98例， 比较治疗前后其ALT，HBV-DNA拷贝值，结果治疗后患者 A L T复常和( 或) HBV，DNA转阴者占62.24％； 血清ALT治疗前后差别显著。李淑平[17]等观察复方三姐妹片治疗慢性乙型肝炎和乙肝病毒携带者308例时得出结果：HBsAg转阴率为32.8%，滴度下降率为39.6%，HBeAg转阴率为58.6%，抗一HBe转阳率为69.2%，与对照组比较差别有显著性；抗一HBolgG转阴率为20.9%，抗一HBs转阳率为9.3%，与对照组比较无差别。此外，李淑平等还观察复方三叶香茶菜片治疗慢性乙型肝炎50例,与用齐墩果酸片30例作对照观察，结果得出结果所示,两组患者治疗后症状与体征均有不同程度改善,差别不显著；两组患者肝功能异常指标,组内治疗前、后比较,差异非常显著,认为两组都有较好的降转氨酶作用；两组间治疗后ALT, AST, GGT和A/ G等指标比较,差别无显著性；而总胆汁酸,总胆红素指标比较,差别有显著性, 复方三叶香茶菜片改善总胆汁酸和总胆红素的疗效优于齐墩果酸片[18]。周培郁[19]等用复方三姐妹片治疗慢性乙型肝炎24例,与用益肝灵治疗的22例作对照,治疗后随访1年，结果治疗组治疗结束时和1年后有效率分别为83.3%和95.8%，HbeAg，HBV-DNA阴转率分别为50.0%，58.3%，均显著高于对照组，治疗组治疗结束时ALT和A/G的复常率分别为91.7%和72.7%，1年后则分别为100%和95.8%，均高于对照组，提示了复方三姐妹片远期疗效优于近期疗效。
3结语
本文只对三叶香茶菜的化学成分和保肝作用进行综述，至于三叶香茶菜的其它具有药用价值的方面有待于研究开发。但是从目前的研究情况看，对三叶香茶菜的保肝作用研究还不是很完善，比如保肝作用的活性成分还未明确，这方面有待于进一步研究。
参考文献
[1] 中国植物志[s].436-437
[2] 王智民，冯浩，梁晓天，等. 虫牙药的化学成分研究[J]. 药学学报. 1996，31(10)：764-769.
[3] Lu GH.從三叶香茶菜分得10-表奥尔古素[J].国外医学中医中药分册.1998，20（2）：52
[4] 纳智，项伟，赵勤实，等. 牛尾草中一新的对映一贝壳杉烷型二萜[J]. 云南植物研究. 2002，24(2)：267～272
[5]吴柳春，覃子龙，蒋秋香. 复方三叶香茶菜片质量标准的改进[J]. 中成药.2008，30（7）：1000-1003
作者简介：主管药师。研究方向：中草药研究。电话：13086797679。Email：mofengwei66@sina.com