华支睾吸虫糖基转移酶基因全长序列的克隆和生物信息学分析

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong416
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目的 分析和预测华支睾吸虫囊蚴全长cDNA质粒文库中编号为cs091c06的糖基转移酶基因EST序列结构和功能特征及其编码蛋白的理化性质,预测该基因的生物学意义和应用前景. 方法 利用NCBI网站和ExPaSy等生物信息学在线分析工具和Vector NTI suite等软件包,分析华支睾吸虫囊蚴全长cDNA质粒文库中cs091c06的EST序列及编码蛋白的理化性质、结构与功能特征. 结果 BLASTx工具分析该EST序列足糖基转移酶的同源基因,序列全长为1 402 bp,其完整的编码框为37~1 011 bp,编码325个氨基酸.Target P和Signal P软件预测该编码氨基酸前30个氨基酸是分泌信号肽,蛋白的理化性质较稳定.蛋白质一级结构扫描发现两个糖基转移酶的保守功能区分别位于67~178 aa和69~253 aa,且在该基因的N端发现明显的蛋白质糖基化位点,分别位于76~79 aa和190~193 aa.在该基因的氨基酸序列中,共发现8个B细胞表位和6个T细胞表位.RT-PCR结果显示,该基因在华支睾吸虫成虫阶段高表达,囊蚴和虫卵阶段低表达. 结论 华支睾吸虫糖基转移酶基因与多个物种同源,编码蛋白可能是华支睾吸虫重要的虫体分泌排泄抗原成分;阶段特异性表达特征提示该基因很可能参与华支睾吸虫重要虫源蛋白糖基化过程,可作为华支皋吸虫病疫苗候选分子和药物靶标.
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