hAP-2α转录因子酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活检测

来源 :中国实验诊断学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：NickFlanders

【摘要】

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目的构建hAP-2α转录因子酵母双杂交诱饵载体,检测hAP-2α转录因子在酵母双杂交中的表达及对报告基因有无激活作用,为进一步研究乳腺癌中hAP-2α转录因子相互作用蛋白的作用

【作者】

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黄前川杨长亮曹军皓丁进亚

【机构】

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广州军区武汉总医院检验科,广州军区武汉总医院耳鼻喉科

【出处】

：

中国实验诊断学

【发表日期】

：

2012年12期

【关键词】

：

hAP-2α 诱饵载体酵母双杂交自激活作用 hAP-2α Baitvector Yeast two-hybrid system Self-activatio

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目的构建hAP-2α转录因子酵母双杂交诱饵载体,检测hAP-2α转录因子在酵母双杂交中的表达及对报告基因有无激活作用,为进一步研究乳腺癌中hAP-2α转录因子相互作用蛋白的作用机制奠定基础。方法通过RT-PCR方法从Hela细胞克隆hAP-2α基因,SalI和EcoRI双酶切后连接诱饵载体pGBKT7,获得诱饵质粒pGBKT7-hAP2α,经测序鉴定后与酵母双杂交空质粒pGBKT7转化到酵母菌株AH109,在营养缺陷培养基中观察pGBKT7-hAP2α的自激活作用,同时利用蛋白印迹法分析诱饵蛋白的表达。结

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