RDPCR检测DNA损伤定位于核苷酸水平的研究

来源 :卫生研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fwj108580853

【摘要】

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目的简化RDPCR建立程序，并在核酸序列水平精确定位DNA损伤。方法培养TK6细胞，抽提基因组DNA，制备k-ras基因外显子2的单链探针。扩增k-ras基因外显子2（以下称短片段）。酶切短片段和

【作者】

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高绪芳饶朝龙文卫华帅培强叶运莉衡正昌

【机构】

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四川大学华西公共卫生学院,成都中医药大学,四川省出入境检验检疫局

【出处】

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卫生研究

【发表日期】

：

2007年2期

【关键词】

：

依赖随机化末端连接物PCR DNA损伤定位检测核苷酸 RDPCR DNA lesion location detection

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目（No.30070648）

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目的简化RDPCR建立程序，并在核酸序列水平精确定位DNA损伤。方法培养TK6细胞，抽提基因组DNA，制备k-ras基因外显子2的单链探针。扩增k-ras基因外显子2（以下称短片段）。酶切短片段和基因组DNA构建损伤模型，前者经依赖随机化末端连接物PCR（RDPCR）扩增，每一步产物作凝胶电泳，终产物与单链探针杂交显色，并进行测序；后者以短片段建立的实验条件进行RDPCR扩增，产物与单链探针杂交显色。并进行测序。结果凝胶电泳可见酶切短片段在RDPCR中每一步骤的目的产物条带；酶切短片段和酶切基因组DNA的

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