奶牛α干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性测定

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：pamfdpv007

【摘要】

：

提取经新城疫病毒诱导培养的奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛α干扰素成熟蛋白基因,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,扩增片段为牛α干扰

【作者】

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李学仁曹瑞兵李斐魏建超陈溥言

【机构】

：

南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室

【出处】

：

中国生物工程杂志

【发表日期】

：

2005年9期

【关键词】

：

奶牛α干扰素毕赤酵母分泌表达抗病毒活性生物活性测定干扰素奶牛 RT-PCR方法 PASTORIS SDS-PAGE Bovine interfero

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提取经新城疫病毒诱导培养的奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛α干扰素成熟蛋白基因,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,扩增片段为牛α干扰素成熟蛋白序列,与Genebank上发表的α1干扰素序列同源性为98%.然后将特异性片段连接到含分泌信号肽序列的Pichia pastoris表达载体pPICZαA上,将重组质粒经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33.转化子经PCR分析鉴定后利用甘油增菌和甲醇诱导,实现了BoIFN-α在毕赤酵母系统中的分泌表达.S

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