SMO特异性siRNA慢病毒载体的筛选构建

来源 :同济大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：yk_001

【摘要】

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目的构建特异性沉默SMO基因的重组慢病毒载体,筛选对T293细胞SMO基因表达抑制效率最高的siRNA。方法根据SMO基因信息,设计了4个小干扰序列和1个阴性对照序列,利用慢病毒质粒

【作者】

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杨波陈卫华温机灵华咏王跃闽

【机构】

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同济大学附属东方医院泌尿外科

【出处】

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同济大学学报(医学版)

【发表日期】

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2009年2期

【关键词】

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SMO基因 RNA干扰慢病毒 SMO gene RNA interference lentivirus

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目的构建特异性沉默SMO基因的重组慢病毒载体,筛选对T293细胞SMO基因表达抑制效率最高的siRNA。方法根据SMO基因信息,设计了4个小干扰序列和1个阴性对照序列,利用慢病毒质粒载体pGCSIL-GFP构建了5个重组质粒。用脂质体将重组慢病毒载体转染293T细胞后,Western blot检测沉默效率,从中筛选沉默效率高的质粒载体进行慢病毒颗粒大量包装。结果测序结果证明4个重组慢病毒质粒载体pGCSIL-GFP-721、pGCSIL-GFP-722、pGCSIL-GFP-723、pGCSIL-GFP-

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