论文部分内容阅读
目的在原核表达系统中表达肠出血性大肠杆菌O157：H7（EHEC O157：H7）Ⅲ型分泌蛋白EspA与Stx2毒素A1亚单位（Stx2A1）的融合蛋白，并对表达蛋白进行纯化及免疫学活性检测。方法PCR扩增espA和stx2A1全长基因，利用重叠延伸PCR技术获得espA-stx2A1融合基因，T-A克隆后插入表达载体pET-28a（＋），构建原核表达质粒pET-28a（＋）．espA-stx2A1，转化大肠杆菌BL21（DE3），分别在37℃和25℃用IPTG诱导表达。以EspA单克隆抗体亲和层析柱纯化