鱼肠道弧菌(Vibrio ichthyoenteri)可引起多种养殖鱼类发病死亡,给鱼类养殖业带来严重经济损失.为解决养殖过程中鱼肠道弧菌的现场快速检测问题,本研究研制了鱼肠道弧菌胶体金快速检测试纸.通过制备兔抗鱼肠道弧菌多克隆抗体,间接ELISA分析发现其与鱼肠道弧菌的外膜蛋白、鞭毛蛋白、胞外产物及全菌破碎蛋白发生阳性免疫反应,与副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的4种抗原蛋白发生程度不等的免疫交叉反应.制备胶体金标记鱼肠道弧菌抗体,确定了鱼肠道弧菌4种抗原蛋白的划线浓度,以4种抗原蛋白作为4条检测线,羊抗兔IgG作为质控线,基于竞争法免疫层析技术研制出鱼肠道弧菌快速检测试纸.对鱼肠道弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌、溶藻弧菌和哈维氏弧菌的检测结果显示,该试纸可以准确鉴别出鱼肠道弧菌,并能判别其他病原菌的交叉反应.该试纸对鱼肠道弧菌的最低检测限为5×105 CFU/mL,检测耗时为10 min.对患病牙鲆组织的检测结果显示,该试纸与ELISA结果一致,表明具有较好的检测准确性.本研究为水产养殖现场的鱼肠道弧菌快速、准确检测提供了有力工具.