研究诱导性ppp2r1a基因全身敲除对成年小鼠的主要生理功能影响并探讨相关机制。
方法将ppp2r1aflox/flox小鼠和CAGG-CreER小鼠杂交繁殖，获得20只CAGG-CreER ppp2r1aflox/flox小鼠，设立为纯合子组，并同时选取同窝野生型小鼠20只，采用单纯随机法，将纯合子、野生型小鼠分别分为4组，共8组，每组5只，腹腔注射他莫昔芬0、2、4、6 d，建立ppp2r1a基因诱导性敲除小鼠模型。采用Western blot法检测主要脏器中PP2A Aα（由ppp2r1a基因编码）的敲除效率，并观察小鼠体重、脏器病理改变以及外周血细胞计数和血生化，采用Real-time PCR法检测肝脏糖脂代谢相关基因的表达改变。
结果他莫昔芬注射6 d后，小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和脑的PP2A Aα敲除效率分别约为35%、12%、15%、60%、69%和72%。他莫昔芬注射6 d后，纯合子小鼠体重[(17.42±1.76)g]低于野生型小鼠[(21.69±1.82)g]（P<0.05)。纯合子小鼠活动减少，腹部和肾周脂肪少，存活不超过7 d。第6天后，纯合子小鼠脾脏的脏器系数[(0.36±0.05)%]低于野生型小鼠[(0.59±0.10)%]（P<0.05)，组织病理HE染色显示脾脏萎缩明显，有核细胞明显减少。Tunel染色发现脾脏中淋巴细胞凋亡增多。纯合子小鼠血浆中谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）水平[(153.68±62.80)U/L和(193.2±44.28)U/L]均高于野生型小鼠[(41.02±12.91)U/L和（69.40±9.55) U/L]（P值均<0.05)，提示ppp2r1a敲除导致肝损伤。纯合子血糖水平[(4.20±1.99)mmol/L]低于野生型[(8.88±0.65)mmol/L](P<0.05)，而总胆固醇、HDL-C和β-羟基丁酸（β-HB）水平[(3.12±0.39)、(1.53±0.38)和(2.49±0.89)mmol/L]均高于野生型小鼠[(1.69±0.92)、(0.78±0.50)和(0.45±0.30)mmol/L]（P值均<0.05)，表明ppp2r1a敲除会扰乱葡萄糖和胆固醇代谢。此外，纯合子小鼠白细胞计数（WBC）和淋巴细胞计数[(1.88±0.89)×109/L和(0.92±0.37)×109/L]低于野生型小鼠[(3.91±0.80)×109/L和(2.74±0.52)×109/L]（P值均<0.05）。纯合子小鼠肝脏中糖异生基因葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）和磷酸烯醇丙酮酸羧化酶的mRNA相对表达水平[(0.46±0.11)和(0.72±0.07)]均低于野生型小鼠[(1.02±0.07)和(1.02±0.06)]（P值均<0.05）。
结论全器官ppp2r1a基因对成年小鼠的存活是必不可少的，且ppp2r1a基因可能通过调控肝脏葡萄糖和胆固醇代谢发挥重要作用。