【摘 要】
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目的:观察低剂量甲氨蝶呤对大鼠脊髓挫伤后神经细胞凋亡的影响,探讨其对神经细胞的保护机制。方法:采用PinPointTM精密皮质撞击器制备大鼠脊髓挫伤模型。伤后30 min皮下注射(
【机 构】
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江西科技师范大学生命科学学院,江西中医药大学附属医院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.30960448);江西省自然科学基金项目(No.20114BAB205033);江西省教育厅科技项目(No.GJJ11596、No.GJJ12584)
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目的:观察低剂量甲氨蝶呤对大鼠脊髓挫伤后神经细胞凋亡的影响,探讨其对神经细胞的保护机制。方法:采用PinPointTM精密皮质撞击器制备大鼠脊髓挫伤模型。伤后30 min皮下注射(sc)甲氨蝶呤(0.3 mg·kg-1·BW),给药时间间隔为24 h,持续2周。分别采用免疫组织化学染色和TUNEL染色方法检测损伤区域神经元核抗原(neuronal nuclei,NeuN)的表达和神经细胞凋亡。结果:伤后1 d各解剖位置灰、白质结构排列整齐;神经元坏死仅见于损伤中心;灰质后角有大量TUNEL阳性细胞表达。伤后3~7 d,TUNEL阳性细胞不仅数量快速地增长,而且向腹侧和损伤灶周边节段蔓延;同时从0 mm处至±3 mm处,NeuN免疫阳性神经元数量也逐渐减少(P<0.05)。伤后14 d在损伤中心已无法辨认灰质结构,但其它解剖位置TUNEL阳性细胞与NeuN免疫阳性神经元的变化均基本趋于平缓;甲氨蝶呤组NeuN免疫阳性神经元数量均高于模型组,且差异具有显著性(P<0.05,P<0.01)。结论:低剂量甲氨蝶呤可能通过其代谢产物抑制或减少神经细胞凋亡,对脊髓继发性损伤发挥保护作用。
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