rAAV规模化包装系统的研究进展

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liangweiyu123
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重组腺相关病毒(r AAV)作为唯一一种通过欧盟FDA认证的基因治疗载体,具有宿主范围广、转染效率高、非致病性、免疫原性低、能够长期表达外源基因的优点。随着以r AAV基因治疗临床试验的深入与扩大,传统r AAV包装系统产能不足的缺点逐渐凸显出来,急需可放大、易规模化的r AAV包装系统来解决现有的供需矛盾。鉴于此,在介绍传统r AAV包装系统的基础之上,着重阐述了杆状病毒昆虫细胞系法、酵母法以及痘苗病毒-腺病毒法,尤其对后者寄予厚望。旨在介绍几种较好的r AAV规模化包装方案,探讨其规模化制备的发展趋势
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将来源于Pseudomonas putida ACCC 10185的ADI编码基因克隆到表达载体p ET-24a(+)中,转化Escherichia coli BL21(DE3),通过超声波破碎得到粗酶液,酶活检测ADI酶活为26 U/m L发酵液