【摘 要】
：
目的观察微小RNA(miRNA，miR)-422a在乳腺癌中的差异表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和迁移的影响，并探讨其作用机制。方法2019年7月至2020年3月，细胞来源于中国科学院上海细胞库，实验分为过表达miR-422a (miR-422a mimic)和对照(Control mimic)两组。通过细胞活性检测试剂盒(CCK-8)和细胞划痕实验检测miR-422a对细胞增殖和迁移
【机 构】
：
同济大学附属上海市第四人民医院肿瘤科 200081,苏州大学附属第二医院肿瘤科 215004
论文部分内容阅读
目的观察微小RNA(miRNA，miR)-422a在乳腺癌中的差异表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和迁移的影响，并探讨其作用机制。
方法2019年7月至2020年3月，细胞来源于中国科学院上海细胞库，实验分为过表达miR-422a (miR-422a mimic)和对照(Control mimic)两组。通过细胞活性检测试剂盒(CCK-8)和细胞划痕实验检测miR-422a对细胞增殖和迁移的影响。酶耦联法检测miR-422a模拟物(mimic)转染MDA-MB-231细胞24 h和48 h后细胞内的葡萄糖吸收率和乳酸生成率。使用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染后细胞中的人乳酸脱氢酶A(LDHA)、丙酮酸激酶(PKM)、己糖激酶2(HK2)和单羧酸转运体1(MCT1)基因表达，蛋白质印迹法(Western blot)检测转染后细胞中的LDHA蛋白表达，组间采用t检验。
结果miR-422a在乳腺癌细胞和组织中呈低表达；对比Control mimic，miR-422a过表达后乳腺癌细胞的增殖明显受到抑制，24 h为0.299±0.040(t＝8.485，P<0.01)，48 h为0.345±0.046(t＝12.390，P<0.01)，72 h为0.462±0.055(t＝15.510，P<0.01)，9 h为0.933±0.050(t＝26.680，P<0.01)；细胞的迁移减慢24 h划痕间距离值为(523±31) μm(t＝3.448，P<0.05)，48 h为(523±31) μm (t＝6.084，P<0.01)。对比Control mimic，miR-422a过表达后细胞内的葡萄糖吸收率下降(24 h：t＝7.228，P<0.05；48 h：t＝12.260，P<0.01)；乳酸生存率下降24 h(t＝5.398，P<0.05)，48 h(t＝21.020，P<0.01)，且两组均48 h下降更明显。miR-422a过表达后乳腺癌细胞的代谢相关基因LDHA(t＝3.772，P<0.05)，HK2(t＝5.011，P<0.01)，PKM(t＝11.260，P<0.01)明显下调，LDHA蛋白表达明显下调(t＝6.928，P<0.01)。
结论miR-422a可能影响代谢基因抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的有氧糖酵解，抑制增殖和迁移。
其他文献
超级增强子是由相临近的增强子组成的一个大簇，在转录过程中富集大量的转录因子和辅因子，并通过增强子本身的表观遗传修饰从而发挥调控基因表达的强大功能。在肿瘤发生发展的过程中，肿瘤细胞中的癌基因可被超级增强子调控，通过将增强子组装为超级增强子，从而在转录水平促进癌基因表达，促进肿瘤的恶性进展；当超级增强子的活性被抑制，肿瘤细胞的恶性表型随之减弱。本文对胸部肿瘤(肺癌及食管癌)，目前报道的超级增强子结构特
目的探讨白毛藤多糖对骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制。方法选取海南省文昌市人民医院骨科2017年1月至2019年1月接收的骨肉瘤患者30例，经病理检测确诊为骨肉瘤，将骨肉瘤细胞分为对照组、白毛藤多糖低、中、高浓度组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-Ebp11组、白毛藤多糖＋si-NC组、白毛藤多糖＋si-Ebp1组。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖抑制率；蛋白质印迹(West
Notch基因家族编码一组高度保守的细胞表面膜受体，其参与的信号通路是决定胚胎组织细胞生长、分化和凋亡的关键通路之一；另一方面，Notch通路的过度表达也被认为是多种血液和实体肿瘤发病的重要分子机制，且具有成为新治疗靶点的潜力。本文拟就该通路在肾癌、膀胱癌、前列癌等泌尿系肿瘤中的研究进展进行综述。
胰腺癌是极度恶性的消化道肿瘤之一，手术切除率低，对放化疗不敏感，5年生存率不足9%，亟需进一步探寻肿瘤细胞死亡逃逸的分子机制并寻找新的生物治疗靶点。铁死亡是近年来发现的一种受调控的铁依赖性细胞死亡形式，与多种疾病的发生和发展具有相关性。既往研究表明调控铁死亡具有诱导胰腺癌细胞死亡、抑制肿瘤生长的作用，同时可能与其他抗肿瘤药物发挥协同作用，提高治疗敏感性。本文综述铁死亡机制的研究进展，阐述其在胰腺癌
目的探讨常压高浓度吸氧对大鼠缺血再灌注肾损伤的作用及其机制。方法2019年6月至2019年8月，选取成年雄性SD大鼠(购自辽宁长生生物技术股份有限公司)18只，均予切除左侧肾脏建立孤肾模型，1周后数字随机分配到3个组中，每组6只，分别为假手术组(S组)、对照组(C组)和实验组(E组)。S组仅钝性分离右肾肾蒂，但不予缺血处理；C组和E组均以动脉夹夹闭肾蒂致右肾缺血40 min。24 h后3组均置于密
目的探讨乳腺癌易感基因1(BRCA1)相关的环结构域蛋白1(BARD1)基因多态性与肾母细胞瘤易感性的关系。方法选取确诊为肾母细胞瘤的患者108例作为观察组，选取同期体检中心健康儿童300例为对照组。两组性别和年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。测定两组BARD1基因上rs7585356、rs6435862和rs3768716位点的基因多态性，并分析其与儿童肾母细胞瘤易感性的相关性。采用χ2
目的探讨中心体相关蛋白激酶2(NEK2)和高迁移率蛋白A2(HMGA2)在乳腺癌组织中的表达水平及其临床意义。方法收集东阳市妇幼保健院2011年1月至2019年6月收治的79例乳腺癌组织和癌旁组织标本应用免疫组织化学法检测NEK2和HMGA2的表达水平，组间比较采用χ2检验。结果乳腺癌组织中的NEK2表达率为70.89%(56/79)，明显高于癌旁组织NEK2表达率24.05%(19/79)，差异
乳腺癌在肿瘤内和肿瘤间均表现出异质性，这种高度的异质性给该肿瘤的研究和治疗带来了巨大的困难。类器官是一种衍生于干细胞或器官祖细胞的新型3D实验模型，具有培养周期短、成功率高等优点。相较于传统的肿瘤细胞株模型(CCL)和患者来源的肿瘤异种移植模型(PDTX)，类器官模型能够在体外长期稳定增殖，既很好的保持了肿瘤异质性，又适用于高通量的药物筛选和基因编辑。目前，类器官技术已在胃肠道肿瘤、胰腺癌、肝癌、
目的观察中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)在神经胶质瘤预后中的价值并探讨其作用机制。方法2015年1月至2018年10月内蒙古自治区人民医院将符合入选标准的神经胶质瘤确诊病例97例，通过血常规检验结果计算NLR值，根据NLR平均值分为高NLR组(NLR≥2.26)35例和低NLR组(NLR<2.26)62例；对不同NLR水平组间的相关临床病理参数行χ2检验，进行定期随访，记录术后总生存时间和无进展
目的探讨乳腺癌细胞周期蛋白D1(CCND1)、Aurora激酶A(AURKA)及成纤维生长因子受体2(FGFR2)基因单核苷酸多态性(SNP)存在和频率及与临床病理和预后的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测新疆医科大学附属肿瘤医院自2014年4月至2019年4月5年间顺序收治的192例女性乳腺癌患者外周血肿瘤增殖相关基因CCND1、AURKA、FGFR2多态