玉米核糖体失活蛋白基因z108在烟草原生质体中的转化及其表达

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：myth_liu

【摘要】

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利用与根癌农杆菌共培养的方法将玉米核糖体失活蛋白基因z108及其融合基因GUS导入烟草叶肉原生质体细胞。试验结果表明,烟草叶片在含有1.0%纤维素酶和0.5%离析酶的裂解液中,

【作者】

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周颖姜国勇

【机构】

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青岛农业大学植物基因工程研究所

【出处】

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生物技术通报

【发表日期】

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2010年4期

【关键词】

：

玉米核糖体失活蛋白烟草原生质体转化 Maize ribosome-inactivating protein gene Tobacco protoplast

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利用与根癌农杆菌共培养的方法将玉米核糖体失活蛋白基因z108及其融合基因GUS导入烟草叶肉原生质体细胞。试验结果表明,烟草叶片在含有1.0%纤维素酶和0.5%离析酶的裂解液中,以0.5M甘露醇、5000.0mg/LCaCl2为渗透压调节剂,25℃保温12-14h,可获得纯化的原生质体细胞;纯化的叶肉原生质体细胞与根癌农杆菌菌株pCam1301/91-108共培养30min,经25mg/L潮霉素筛选,转化率可达17.84%。转化体细胞经X-Gluc染色、PCR和RT-PCR检测证明玉米核糖体失活蛋白基因z1

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