【摘 要】
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目的:探讨中药肺复康方对体外培养人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,及其相关基因表达蛋白的影响,为肺腺癌的药物治疗提供理论依据。方法:体外培养的人肺腺癌A549细胞中加入
【机 构】
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永州市第一人民医院; 湘潭市第二人民医院; 邵阳市中医院; 中南大学湘雅医学院附属湖南省肿瘤医院中医/中西医结合科;
【基金项目】
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非小细胞肺癌中医药研究平台（PT-2012004）
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目的:探讨中药肺复康方对体外培养人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,及其相关基因表达蛋白的影响,为肺腺癌的药物治疗提供理论依据。方法:体外培养的人肺腺癌A549细胞中加入不同浓度的肺复康方含药血清,MTT比色法测定细胞抑制率,Annexin V/IP双染色流式法测定细胞凋亡率,使用定量蛋白质组学串联质谱标签(TMT)联合液相色谱串联质谱(LTQ Orbitrap Velospro)对蛋白质进行定量分析。结果:(1)MTT结果提示含药血清对A549有抑制作用,并存在效应-剂量依赖关系。(2)流式细胞检测结果显示肺复康方低、中、高剂量组的早期凋亡率分别为3.7%、5.3%、12.6%,较空白对照组早期凋亡率为1.3%,组间比较有统计学差异。中药复方低、中、高剂量组细胞凋亡率分别为7.4%、8.7%、19.4%,与空白对照组比较有统计学差异。提示肺复康方能够诱导A549细胞的凋亡。(3)TMT标记蛋白结果分析:共找到2008个蛋白,其中A126(高浓度)/127(空白对照组),上调大于1.5倍的74个,下调小于0.67倍的26个;A129(中浓度)/127(空白对照组),上调大于1.5倍的38个,下调小于0.67倍的3个;A128(低浓度)/127(空白对照组),上调大于1.5倍的6个,下调小于0.67倍的3个;A130(顺铂组)/127(空白对照组),上调大于1.5倍的2个,下调小于0.67倍的2个;发现肺能够复康方提高细胞中Bax和Bak蛋白的表达,并降低Bcl-2,Bcl-xl蛋白的表达,提示肺复康方主要影响与细胞周期相关的信号通路。结论:肺复康方可抑制肺腺癌A549细胞的增殖和诱导肿瘤诱导凋亡,主要通过提高细胞中Bax和Bak蛋白的表达,降低Bcl-2,Bcl-xl蛋白的表达。
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