【摘 要】
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建立了基于适配体的农药水胺硫磷和丙溴磷的荧光检测方法。采用可特异性识别水胺硫磷和丙溴磷、且5’端标记荧光基团FAM的核酸适配体(F-ss DNA),与3’末端标记猝灭基团DABCYL
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.31201369);安徽省高校优秀人才支持计划重点项目(No.gxyq ZD2016219);安徽科技学院自然科学研究项目(No.ZRC2014395)资助~~
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建立了基于适配体的农药水胺硫磷和丙溴磷的荧光检测方法。采用可特异性识别水胺硫磷和丙溴磷、且5’端标记荧光基团FAM的核酸适配体(F-ss DNA),与3’末端标记猝灭基团DABCYL的短链序列(Q-ss DNA)互补杂交形成双链结构,荧光基团的荧光被淬灭,荧光信号很弱;此时加入靶分子,特异性结合核酸适配体,引起互补短链序列从双链结构中解离,使适配体荧光信号增强,基于此可实现水胺硫磷、丙溴磷的定量检测。优化后的检测条件为:将终浓度为25 nmol/L F-ss DNA与50 nmol/L Q-ss DNA在25℃孵育20 min,使二者杂交形成双链适配体探针复合物,加入等体积的农药样品孵育60 min,然后检测体系的荧光信号变化值ΔI。在最佳条件下,ΔI与水胺硫磷和丙溴磷的浓度均在50~500μmol/L范围内呈线性关系。水胺硫磷的检出限(LOD,3σ)为11.4μmol/L,相对标准偏差(RSD)为5.8%(n=10);丙溴磷的检出限为14.0μmol/L,RSD为4.9%(n=10)。用于实际水样中两种农药的检测,加标回收率为85.8%~95.3%
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