大鼠血红素氧化酶1的基因克隆和原核表达

来源 :吉林大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tonghuasong00000
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目的:从大鼠脾中克隆出血红素氧化酶1(RHO-1)基因,构建其原核表达载体,并在大肠杆菌中表达其蛋白。方法:用RT—PCR从大鼠脾总RNA中扩增出RHO-1cDNA,并将其克隆人pMD18-T载体,经TA克隆测序分析后,将阳性TA克隆RHO-1片段亚克隆人pET28a(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL-21,经限制性内切酶图谱鉴定后,阳性菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE分析。结果:TA克隆测序分析证实该基因全长870bp,编码289个氨基酸,所克隆的基因序列与GenBank中登录的RHO-1基因序列
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