【摘 要】
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本试验旨在探究大麻二酚（CBD）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠乳腺上皮细胞氧化损伤的保护作用及其分子机制。以小鼠乳腺上皮细胞系HC11作为培养细胞。利用MTT法筛选CBD的最佳作用浓度,最终选择2、4、6μmol/L CBD作为后续试验的作用浓度。分别用1μg/mL LPS单独处理,2、4、6μmol/L CBD与1μg/mL LPS共处理HC11细胞,并设不进行药物处理的对照组,处理24 h后分别
【基金项目】
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黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目（135409428）；
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本试验旨在探究大麻二酚（CBD）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠乳腺上皮细胞氧化损伤的保护作用及其分子机制。以小鼠乳腺上皮细胞系HC11作为培养细胞。利用MTT法筛选CBD的最佳作用浓度,最终选择2、4、6μmol/L CBD作为后续试验的作用浓度。分别用1μg/mL LPS单独处理,2、4、6μmol/L CBD与1μg/mL LPS共处理HC11细胞,并设不进行药物处理的对照组,处理24 h后分别检测氧化应激相关指标、抗氧化相关基因mRNA和蛋白表达的变化。结果显示:1)与对照组相比,1μg/mL LPS处理后HC11细胞内活性氧（ROS）大量生成,丙二醛（MDA）含量显著增加（P＜0.05）;与LPS组相比,2、4、6μmol/L CBD预处理后HC11细胞内ROS含量明显下降,MDA含量显著降低（P＜0.05）,其中以6μmol/L CBD的效果最为显著。2)与对照组相比,1μg/mL LPS处理后HC11细胞内谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和总抗氧化能力（T-AOC）均极显著降低（P＜0.01）。与LPS组相比,2μmol/L CBD预处理显著或极显著提高HC11细胞内SOD活性和T-AOC（P＜0.05或P＜0.01）,而GSH-Px活性则无显著变化（P＞0.05）;4、6μmol/L CBD预处理则均能极显著提高HC11细胞内GSH-Px、SOD活性和T-AOC（P＜0.01）。3)与对照组相比,1μg/mL LPS处理后HC11细胞内转录因子E2相关因子2（Nrf2）、NAD（P） H醌氧化还原酶1（NQO1）、血红素加氧酶-1（HO-1）和超氧化物歧化酶1（SOD1）的mRNA相对表达量均显著或极显著下调（P＜0.05或P＜0.01）;加入不同浓度CBD与LPS共处理时,与LPS组相比,Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1的mRNA相对表达量均极显著上调（P＜0.01）。4)与对照组相比,1μg/mL LPS处理后HC11细胞内Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1的蛋白相对表达量显著或极显著下降（P＜0.05或P＜0.01）;加入不同浓度CBD与LPS共处理时,与LPS组相比,Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1的蛋白相对表达量显著或极显著上调（P＜0.05或P＜0.01）。综上所述,在LPS诱导的小鼠乳腺上皮细胞氧化损伤模型中,适宜浓度的CBD可以通过激活Nrf2信号通路促进抗氧化酶HO-1、NQO1和SOD1的表达,清除细胞内过多的ROS和MDA,从而对LPS诱导的细胞氧化损伤起到保护作用。
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