【摘 要】
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目的研究靶向端粒酶逆转录酶(hTERT)的短发夹状RNA(shRNA)基因转染对前列腺癌细胞体外生长的抑制效应及其促细胞凋亡作用。方法在脂质体介导下将针对hTERT基因的shRNA表达载
【机 构】
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首都医科大学附属北京朝阳医院泌尿外科,华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科
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目的研究靶向端粒酶逆转录酶(hTERT)的短发夹状RNA(shRNA)基因转染对前列腺癌细胞体外生长的抑制效应及其促细胞凋亡作用。方法在脂质体介导下将针对hTERT基因的shRNA表达载体psilencer-TRT转染前列腺癌细胞PC-3m,得到稳定细胞株PC-3m/shRNA-TRT。采用RT-PCR检测hTERT基因表达情况,western blot分析各组细胞hTERT及c-myc蛋白表达变化,细胞计数并绘制细胞生长曲线,Hoechst33258染色、透射电镜、流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果重组质粒psi-lencer-TRT转录生成的shRNA使实验组细胞的hTERT基因表达显著下调,抑制率约为89.02%;同时实验组细胞hTERT及c-myc蛋白水平较对照组有明显下降,细胞的生长增殖能力也显著降低(P<0.05),生长速率明显变慢,部分细胞呈现凋亡形态学改变,凋亡率为(19.69±4.75)%。结论hTERT短发夹状RNA能有效抑制前列腺癌细胞中hTERT表达及癌细胞生长,诱导PC-3m细胞凋亡,可望为前列腺癌的基因治疗提供新方法。
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