岩原鲤HSC70基因的克隆、序列分析及其组织表达研究

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采用RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)技术从岩原鲤Procypris rabaudi脑组织中克隆出长1043bp的组成型热休克蛋白HSC70(heat shock cognate70)基因的cDNA(complementary deoxyribonucleic acid)部分片段,其编码的347个氨基酸包含HSP70家族签名序列(IVLVGGSTRIPKIQK),核定位信号标签(KRKH-KKDISDNKRAVRR)及2个糖基化位点(NKSI/NVSA)。采用相同引物从岩原鲤基因组DNA中扩增出长1418bp的HSC70基因片段,比对分析显示其含有3个分别长200bp、98bp和77bp的内含子。氨基酸序列同源性分析显示,HSC70基因氨基酸序列具有高度保守性,岩原鲤HSC70基因氨基酸序列与草鱼Ctenopharyngodon idellus的同源性达到了100%,与其他脊椎动物的同源性为95.68%~99.71%。FQ-PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR)方法检测显示,岩原鲤HSC70基因存在明显的组织表达差异,在脑中相对表达量最高,其次为卵巢、心、肌肉和肾,在肝中相对表达量最少。
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