艾叶提取物对HepG2.2.15细胞凋亡和乙型病毒性肝炎病毒复制的影响

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目的 研究艾叶提取物对HepG2.2.15细胞凋亡和乙型病毒性肝炎(乙肝)病毒复制的影响.方法 取人肝癌HepG2.2.15细胞,以0,25,50,100和200μg·mL-1艾叶提取物处理48 h后,用噻唑蓝(MTT)法测定细胞活力.另取HepG2.2.15细胞随机分为对照组和艾叶提取物组,以Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,以蛋白质印迹(Western Blot)法检测各组HepG2.2.15细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、乙肝病毒X蛋白(HBx)蛋白表达水平,用酶联免疫吸附法检测细胞上清液中乙肝表面抗原和e抗原.选取细胞BRL、HepaRG和HepG2.2.15,以West-ern Blot法检测各组细胞中 β-catenin、c-Myc和survivin蛋白表达水平.将HepG2.2.15细胞分为艾叶提取物组和艾叶提取物+LiCl组,以Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,以Western Blot检测各组HepG2.2.15细胞中Bax、Bcl-2和HBx蛋白表达水平,用酶联免疫吸附法检测细胞上清液中乙肝表面抗原和e抗原.结果 0,25,50,100和200μg·mL-1艾叶提取物组细胞活力分别为0.81±0.09,0.76±0.07,0.69±0.08,0.57±0.06和0.43±0.04.对照组和艾叶提取物组细胞凋亡率分别为(3.89±0.75)% 和(19.07±1.82)%;Bax蛋白表达分别为0.23±0.04和0.79±0.08;Bcl-2蛋白表达分别为0.82±0.13和0.36±0.05,HBx蛋白表达分别为1.13±0.15和0.42±0.06,β-catenin蛋白表达分别为0.91±0.12和0.42±0.05,c-Myc蛋白表达分别为1.07±0.13和0.49±0.07,survivin蛋白表达分别为0.83±0.09和0.35±0.04,差异均有统计学意义(均P<0.05).艾叶提取物组与艾叶提取物+LiCl组细胞活力分别为0.40±0.05和0.68±0.09;细胞凋亡率分别为(22.19±3.12)%和(7.85±0.93)%;Bax蛋白表达分别为0.85±0.08和0.41±0.06;Bcl-2蛋白表达分别为0.30±0.05和0.64±0.07;HBx蛋白表达值分别0.40±0.06和0.87±0.09,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 艾叶提取物可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路激活进而诱导HepG2.2.15细胞凋亡和抑制乙肝病毒的复制.
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