阻断巨噬细胞NFKB-p65通路对香烟促进非小细胞肺癌NCI—H520细胞株增殖的影响

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研究香烟对非小细胞性肺癌(NSCLC)NCI-H520细胞株增殖的影响以及巨噬细胞在此过程中的作用。方法 采用“Transwell? Inserts”细胞培养室培养系统共培养人原代巨噬细胞或分化为巨噬细胞的人单核巨噬细胞株U937细胞和NCI-H520细胞。应用免疫印迹法和凝胶电泳迁移实验检测NF?B通路的激活;应用NF?B -p65 shRNA干扰质粒抑制U937细胞p65 表达;利用BrdU ELISA分析香烟抽提物(CSE)对NCI-H520细胞的促增殖效应;ELISA分析炎症细胞因子TNF?和IL-6的释放。结果 共培养及香烟刺激增强了人巨噬细胞的NF?B -p65的入核,以及同靶基因结合的活力。与对照组相比, NCI-H520细胞经不同浓度CSE单独处理,并没有发现肺癌细胞增殖明显加快(p〉0.05);而经过与人原代巨噬细胞或分化为巨噬细胞的U937细胞共培养4天,不仅发现巨噬细胞明显促进NCI-H520细胞的增殖(p〈0.01),而且观察到CSE的刺激显著增强这一效应(p〈0.01)。NF?B -p65shRNA干扰质粒明显抑制了U937细胞的NF?B -p65表达,抑制了NF?B通路的激活,减弱了CSE对NCI-H520细胞增殖的影响(p〈0.01),同时也抑制了炎性因子IL-6和TNF?释放(p〈0.01)。结论 香烟通过巨噬细胞的中介促进NCI-H520细胞的增殖。采用RNA干扰技术阻断巨噬细胞的NF?B通路显著地抑制香烟促进的肺癌细胞的增殖,削弱香烟引起的巨噬细胞的炎症因子释放可能是其作用机制。

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