【摘 要】
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目的 观察基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor 1,SDF-1)在小鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)中表达的动态变化,分析其与巨噬细胞的相关性,探讨其在IRI免疫炎性反应中的作用.方法 采用健康雄性C57BL/6小鼠双侧肾蒂夹闭35 min建立肾脏IRI模型.分别于再灌注1d、3d、5d、14 d后收集肾组织样本,HE染色光镜下观察肾脏病理改变;采用实时荧光定量
【机 构】
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210006南京医科大学附属南京医院肾内科,210006南京医科大学附属南京医院肾内科,210006南京医科大学附属南京医院肾内科,210006南京医科大学附属南京医院肾内科,210006南京医科大学
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目的 观察基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor 1,SDF-1)在小鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)中表达的动态变化,分析其与巨噬细胞的相关性,探讨其在IRI免疫炎性反应中的作用.方法 采用健康雄性C57BL/6小鼠双侧肾蒂夹闭35 min建立肾脏IRI模型.分别于再灌注1d、3d、5d、14 d后收集肾组织样本,HE染色光镜下观察肾脏病理改变;采用实时荧光定量PCR、ELISA法和免疫组织化学法分别检测小鼠肾组织SDF-1的表达及分布.建立小鼠IRI模型前给予腹腔注射氯膦酸二钠脂质体(liposomal clodronate,LC)去除巨噬细胞,免疫荧光染色检测巨噬细胞标志物CD68的表达及分布;检测去除小鼠巨噬细胞后肾脏组织形态学改变及SDF-1的表达变化.结果 HE染色显示IRI小鼠肾脏可见典型肾小管损伤,大量炎性细胞浸润.实时荧光定量PCR和ELISA法结果显示,与假手术组比较,IRI组小鼠肾脏SDF-1mRNA和蛋白表达水平在造模后1d明显升高并达到峰值,差异有统计学意义(均P＜0.05),第5天下降,但仍高于正常水平,14d时恢复至正常水平.免疫组化结果显示,正常小鼠肾脏SDF-1主要表达在皮质,IRI后SDF-1呈高表达并扩展至皮髓交界区域,且SDF-1表达呈时间依赖性下调.与IRI组相比,LC组肾组织CD68表达明显减少,1d时肾组织IR病理改变减轻,且SDF-1表达上调(P＜0.05).结论 肾脏IRI初期,SDF-1在肾脏组织中高度表达,并与M1型巨噬细胞有关,临床上也可用作诊断早期急性肾损伤(AKI)的生物学标准。
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