观察高氧暴露对新生小鼠肺组织Sox17表达的影响,探讨肺血管发育受阻的发生机制。
方法生后6 h内的健康新生C57Bl/6J小鼠共32只,随机分为高氧组和空气组,每组16只。高氧组小鼠置于氧体积分数为85%的氧舱中。分别于生后7和14 d,每组各取8只小鼠,取肺组织行形态学检测,并计算从呼吸性细支气管中心至最近纤维隔或胸膜直线上的肺泡数,即辐射状肺泡计数(radial alveolar counts,RAC)。免疫组织化学染色检测肺血管Sox17蛋白表达。逆转录聚合酶链反应技术检测肺组织中Sox17 mRNA的表达。蛋白质印迹技术检测Sox17蛋白含量。统计学方法采用独立样本t检验。
结果与生后7 d比较,空气组小鼠生后14 d的肺组织结构日趋成熟,肺泡数量增加,大小均一,肺泡间隔逐渐变薄;而高氧组小鼠生后14 d肺泡数量增加较缓慢,肺泡结构简单化,大小不一。Sox17蛋白主要表达在肺动脉、肺静脉和肺泡毛细血管内皮,以及肺泡上皮细胞。生后7和14 d时,高氧组RAC值均低于空气组[分别为(3.7±0.7)与(5.0±0.8),(5.3±0.6)与(8.3±0.9)个],差异均有统计学意义(t值分别为3.057和8.148,P值均<0.01)。生后7和14 d,高氧组Sox17 mRNA水平均低于空气组(分别为0.62±0.10与0.88±0.11,0.44±0.06与0.90±0.15),差异均有统计学意义(t值分别为3.607和6.926,P值均<0.01)。生后7 d和14 d,高氧组Sox17蛋白含量也低于空气组(分别为0.32±0.04与0.76±0.04,0.36±0.07与0.96±0.06),差异均有统计学意义(t值分别为3.102和8.421,P值均<0.01)。
结论高氧可能通过抑制肺组织Sox17的表达,从而导致肺血管发育不良。