【摘 要】
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以新疆奶花芸豆为原料提取凝集素,以单因素实验结果为依据,结合响应面实验对提取工艺进行优化。通过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-50和DEAE-A50阴离子交换层析进一步纯化,并利
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以新疆奶花芸豆为原料提取凝集素,以单因素实验结果为依据,结合响应面实验对提取工艺进行优化。通过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-50和DEAE-A50阴离子交换层析进一步纯化,并利用SDS-PAGE电泳、质谱/质谱联用(LC-MS/MS)技术进行蛋白鉴定。结果表明,最佳提取工艺为:料液比1∶13 g/mL,pH7.4,提取时间18.5 h,在此条件下凝集素特异性活力为(13.26±0.26)×10~3HU/mg。经过纯化后的目标蛋白特异性活力达到(59.93±0.31)×10~3HU/mg。经鉴定目标蛋白为奶花芸豆凝集素,分子量在31 kDa左右。
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