【摘 要】
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目的：原核表达并纯化、鉴定人生长分化因子15（GDF-15）,制备其多克隆抗体。方法：从人结肠癌细胞系HT29的cDNA扩增出GDF-15基因片段并插入pET-32a（＋）原核表达载体,转化大肠杆菌BL21,IP
【机 构】
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肿瘤生物学国家重点实验室,第四军医大学药学系生物制药学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金(81171978,81301785)
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目的：原核表达并纯化、鉴定人生长分化因子15（GDF-15）,制备其多克隆抗体。方法：从人结肠癌细胞系HT29的cDNA扩增出GDF-15基因片段并插入pET-32a（＋）原核表达载体,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达重组GDF-15,用镍亲和柱纯化,SDS-PAGE、Western印迹鉴定重组蛋白。用纯化的重组GDF-15免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,鉴定并检测其效价。结果：制备了pET-32a（＋）-GDF-15表达载体;经IPTG诱导重组蛋白表达后,采用Ni亲和柱纯化蛋白,并经SDS-P
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