探讨罗格列酮对支气管哮喘(简称哮喘)急性发作期患者T淋巴细胞转录因子T-bet与转录因子GATA-3表达的调控、对Th1/Th2细胞因子的影响及与地塞米松(DXM)作用机制的异同
方法哮喘急性发作期患者(A组)10例及健康自愿者(B组)10名.分离、纯化、培养外周血T淋巴细胞,根据实验要求将两组分为3、24h组,再根据不同的干预分为:未干预对照组(A1组、B1组)、罗格列酮干预组(A2组、B2组)及DXM干预组(A3组、B3组);用酶联免疫吸附(ELISA)法检测T淋巴细胞培养上清液中γ干扰素(IFN-γ)及白细胞介素4(IL-4)的水平,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测T淋巴细胞T-bet mRNA、GATA-3 mRNA的表达水平
结果A组3、24h T淋巴细胞培养上清液中IFN-γ、IFN-γIL-4和T淋巴细胞的T-bet mRNA、T-bet mRNA/GATA-3 mRNA水平分别为357±31、783±47、5.5±1.0、8.4±1.5、18.7±3.7、11.9±2.9、1.20±0.11、0.290±0.020,与B组3、24 h(659±41、1394±120、11.5±3.0、17.4±4.0、29.0±4.0、18.9±4.0、3.82±0.81、0.870±0.090)比较差异有统计学意义(t值分别为18.59、5.95、14.87、6.25、6.06、4.63、10.23、18.67,P均＜0.05),A组3、24 h IL-4、GATA-3 mRNA水平分别为65±6、96±9、16.4±4.2、41±6,与B组3、24 h(57±5、83±7、7.8±2.2、23±4)比较差异有统计学意义(t值分别为3.19、3.90、5.77、7.76,P均＜0.05);A、B组T淋巴细胞培养上清液中IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4在3 h水平分别为357±31、65±6、5.5±1.0、659±41、57±5、11.5±3.0,与24 h(783±47、96±9、8.4±1.5、1394±120、83±7、17.4±4.0)水平比较差异有统计学意义(t值分别为23.8、9.48、5.03、18.21、9.01、3.53,P均＜0.05);A、B组T淋巴细胞T-bet mRNA和T-bet mRNA/GATA-3 mRNA在3 h时分别为18.7±3.7、1.20±0.11、29.0±4.0、3.82±0.81,与24 h(11.9±2.9、0.290±0.020、18.9±4.0、0.870±0.090)水平比较差异有统计学意义(t值分别为4.62、5.66、29.67、11.5,P均＜0.05),但A、B组GATA-3 mRNA在3 h(16.4±4.2、7.8±2.2)的水平,分别低于24h(41±6、23±4)水平(t值分别为10.70、10.11,P均＜0.05);A组T淋巴细胞T-bet mRNA表达与T淋巴细胞培养上清液中IFN-γ呈正相关(r=0.581,P＜0.05),与IL-4呈负相关(r=-0.493,P＜0.05);A组GATA-3 mRNA表达与IFN-γ呈负相关(r=-0.501,P＜0.05),与IL-4呈正相关(r=0.579,P＜0.05);A组T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值与IFN-γ/IL-4比值呈正相关(r=0.696,P＜0.05)
结论罗格列酮通过影响哮喘急性发作期患者T淋巴细胞T-bet和GATA-3的表达,从而调控IFN-γ和IL-4的平衡.