小鼠釉基质丝氨酸蛋白酶成熟肽编码区cDNA的克隆和序列分析

来源 :牙体牙髓牙周病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:HanMa_1978
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目的 :克隆小鼠釉基质丝氨酸蛋白酶 (EMSP)成熟肽编码区的基因。方法 :设计引物 ,以小鼠牙胚总RNA为模板 ,利用RT -PCR方法 ,扩增出小鼠EMSP的基因片段 ,将所得基因片段插入pBS质粒载体 ,转化到大肠杆菌XL - 1-Blue后挑选阳性克隆 ,提取重组质粒DNA ,通过限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果 :重组质粒pBS -EMSP的酶切图谱和序列分析结果与国外文献报道一致。结论 :克隆到小鼠EMSP成熟肽编码区基因 OBJECTIVE: To clone the gene encoding the mature peptide of mouse enamel matrix serine protease (EMSP). Methods: Primers were designed to amplify the mouse EMSP gene by RT - PCR using mouse tooth germ total RNA as a template. The resulting gene fragment was inserted into pBS plasmid vector and transformed into E. coli XL - 1 - Blue Positive clones were picked, recombinant plasmid DNA was extracted, and positive clones were identified by restriction analysis and nucleotide sequence analysis. Results: Restriction map and sequence analysis of recombinant plasmid pBS -EMSP were consistent with those reported in foreign literature. Conclusion: The mouse EMSP mature peptide coding region gene was cloned
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