检测结核分枝杆菌的BSL-2实验室污染状况的实验评价

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目的通过检测生物安全二级(BSL-2)实验室结核分枝杆菌(MTB)的污染情况,对BSL-2实验室安全性进行评估。方法用FA-2型撞击式空气微生物采样器采集MTB检验前、中、后的空气样本收集于血平板和生理盐水采样介质;用物表采样规格板和棉拭子采集物体表面样本。血平板采集的空气样本孵育后,挑取菌落行革兰染色镜检和16S rRNA菌种鉴定。物表样本和以生理盐水为介质的空气样本经N-乙酰-L-半胱氨酸(NALC)/NaOH前处理,采用MTB特异性荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测MTB;同时接种改良罗氏中性培养基和MTB液体培养基培养MTB。结果改良罗氏中性培养基未见分枝杆菌生长,液体培养基检出的2例分枝杆菌经测序证实分别属于MTB复合群和脓肿分枝杆菌;有2%(15/779)的样本MTB核酸阳性,且均来自进行药敏试验的2个BSL-2实验室;有26.7%(8/30)的来自生物安全柜的血平板采样的样本平皿菌落量达2+或以上,测序分析显示主要为葡萄球菌属、芽孢杆菌属、不动杆菌属。结论受检医院BSL-2实验室MTB污染状况总体可控,但进行MTB药敏试验的实验室应重点加强生物安全防护。
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