目的观察抑制KLF8基因对肝癌干细胞CD133⁺表型细胞亚群比例、裸鼠体内成瘤和肺转移能力的影响。方法收集肝癌患者的肺转移灶,分离培养原代肝癌细胞,无血清悬浮培养形成肝癌细胞球,经流式分选筛选出CD133⁺表型的肝癌干细胞细胞亚群（LCSCs）。将KLF8基因的RNA干扰重组慢病毒质粒（sh-KLF8）及其阴性对照空载体质粒（sh-control）分别感染LCSCs,经2. 0μg/m L嘌呤霉素筛选,成功构建稳定敲除KLF8基因的CD133⁺表型肝癌干细胞株LCSCs_sh-KLF8及对照细胞株LCSCs_sh-control,qRT-PCR法检测KLF8 mRNA,流式细胞术检测CD133⁺表型细胞亚群比例。分别注射LCSCs_sh-KLF8和LCSCs_sh-control构建肝癌干细胞裸鼠移植瘤模型,观察敲除KLF8基因对肝癌干细胞裸鼠体内成瘤能力的影响（成瘤重量）。另将LCSCs_sh-KLF8和LCSCs_sh-control分别经尾静脉注射到裸鼠体内,构建肝癌干细胞的裸鼠肺转移模型,观察敲除KLF8基因对肝癌干细胞裸鼠体内肺转移能力的影响（肺转移灶个数、KLF8蛋白）。结果与LCSCs_sh-control比较,LCSCs_sh-KLF8中KLF8 mRNA相对表达水平降低,分选时CD133⁺表型干细胞亚群的比例显著降低,裸鼠体内的成瘤重量和肺转移的数量降低,KLF8蛋白阳性着色较少（P均<0. 05）。结论抑制KLF8基因可降低肝癌干细胞CD133⁺表型细胞亚群比例及体内成瘤、肺转移能力,KLF8基因可能是抑制肝癌发生和进展的关键分子。