研究慢性粒细胞性白血病病理发生中下游信号传导和分子调控的干细胞模型

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目的获得慢性粒细胞白血病人原代干祖细胞模型,旨在研究慢粒白血病病理发生中信号传导的分子机制.方法转导b3a2 bcr/abl cDNA 到正常人CD34+细胞中构建人原代慢性粒细胞性白血病模型.采用细胞免疫组化测定了p210BCR/ABL在CD34+细胞中的表达;细胞粘附、迁移实验进行模型鉴定;FACS法测定了p210BCR/ABL转导及对照CD34+细胞p27kip和MDR-1 Pgp的表达.结果相对于对照的CD34+细胞,转导了bcr/abl的CD34+细胞对纤粘连蛋白(fibronectin, FN)的粘附性下降;而在FN上的迁移能力增强;在低浓度细胞因子或血清条件下表现为凋亡延迟;细胞的粒系克隆形成单位数量明显增多, 这一模型再现了原代慢粒白血病的异常表型特征,并以此模型发现p210BCR/ABL转染CD34+细胞上调了p27Kip水平并可诱导MDR-1 Pgp异常表达.结论该模型适用于慢粒病理发生中的信号分子传导及分子调控研究,提示了慢粒耐药的分子机制.
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