大鼠Fas shRNA真核表达质粒的构建及其生物活性的鉴定

来源 :徐州医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yongsheng0550

【摘要】

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目的构建大鼠FasshRNA真核表达重组质粒，并检测其对NRK-52E细胞（大鼠肾小管上皮细胞）Fas基因的沉默效率，筛选出一个最有效干扰质粒。方法按照siRNA设计原则，在大鼠Fas基因mRNA上挑

【作者】

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李海龙温儒民薛松肖永双孙晓青

【机构】

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徐州医学院附属医院泌尿外科

【出处】

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徐州医学院学报

【发表日期】

：

2012年9期

【关键词】

：

Fas蛋白(CD95) RNA干扰 SHRNA 移植免疫耐受

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目的构建大鼠FasshRNA真核表达重组质粒，并检测其对NRK-52E细胞（大鼠肾小管上皮细胞）Fas基因的沉默效率，筛选出一个最有效干扰质粒。方法按照siRNA设计原则，在大鼠Fas基因mRNA上挑选4个干扰靶序列，再根据靶序列分别设计并合成两端含有酶切位点的总长度为64bp的shRNA转录模板DNA正、反义寡核苷酸链，并将其退火后克隆至空载体pSliencerTM3．1～H1 neo siRNA Expression Vector中，对其进行鉴定。用Lipofectamine LTX Reagent将

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