【摘 要】
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病程相关蛋白(PR)广泛参与植物对生物和非生物胁迫的应答。采用cDNA末端快速克隆技术,从东方百合(Lilium)杂交品种索邦中克隆了PR1基因,并命名为LhSorPR1。LhSorPR1基因cDNA
【机 构】
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中国科学院西北生态环境资源研究院皋兰农业与生态综合研究站; 中国科学院大学;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31101190);宁夏农业综合开发科技推广项目(NTKJ2015-05-01);中国科学院“百人计划”项目(Y629721002);中国科学院关键技术人才项目(2016-65);中国博士后科学基金项目(2015M580894);2014年中国科学院"西部之光"重点项目
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病程相关蛋白(PR)广泛参与植物对生物和非生物胁迫的应答。采用cDNA末端快速克隆技术,从东方百合(Lilium)杂交品种索邦中克隆了PR1基因,并命名为LhSorPR1。LhSorPR1基因cDNA全长870bp,5’非翻译区和3’非翻译区的长度分别为47bp和274bp。该基因的开放阅读框为549bp,编码182个氨基酸。成熟的LhSorPR1蛋白(不含信号肽)分子量为18.19kDa,等电点为5.69。采用同源建模方式构建的LhSorPR1蛋白三维结构与其模板番茄PR1蛋白p14a具有较高的相似性,说明百合PR1蛋白在结构和功能上与其他植物中的PR1蛋白具有较强的保守性。构建pCold II-LhSorPR1原核表达,经IPTG诱导后,目的蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式成功表达。使用免疫印迹方法对表达的LhSorPR1重组蛋白进行了验证,并对带有His标签的重组蛋白成功进行了纯化。
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