【摘 要】
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目的 研究淋巴瘤细胞DNA结合抑制因子4(inhibitor of DNA binding,Id4)基因甲基化及As2O3去甲基化效应.方法 体外培养人Burkitts淋巴瘤细胞系Raji细胞,设对照组和用不同浓度A
【基金项目】
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河北省卫生厅医学科学研究重点课题;
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目的 研究淋巴瘤细胞DNA结合抑制因子4(inhibitor of DNA binding,Id4)基因甲基化及As2O3去甲基化效应.方法 体外培养人Burkitts淋巴瘤细胞系Raji细胞,设对照组和用不同浓度As2O3处理Raji细胞不同时间的实验组.用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测各组Raji细胞Id4基因甲基化程度;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同浓度As2O3处理前后Raji细胞Id4mRNA的表达情况.应用MTT比色法检测细胞增殖情况;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡并分析As2O3对细胞周期的影响.结果 ①Raji细胞Id4基因呈完全甲基化状态,Raji细胞Id4基因高甲基化状态可被As2O3逆转,且与As2O3的剂量有关.②不同浓度As2O3处理Raji细胞48 h后,随着药物浓度增加,Raji细胞中Id4基因mRNA的相对表达量逐渐增加,呈一定剂量依赖关系.③不同浓度As2O3处理Raji细胞24、48、72 h后细胞增殖抑制率为12.15%～92.17%,且作用呈时间剂量依赖性(P＜0.05);④FCM检测细胞凋亡结果显示,As2O3处理Raji细胞48 h后均出现明显的凋亡峰,对照组未见凋亡峰或仅有低平的凋亡峰;⑤FCM细胞周期分析结果显示,不同浓度As2O3处理Raji细胞48 h后,细胞阻滞于G0/G1期,且随着As2O3浓度的增加,阻滞作用增强,呈一定剂量依赖关系.结论 ①人Burkitts淋巴瘤细胞系Raji细胞中Id4基因呈完全甲基化状态.②As2O3可以逆转Raji细胞Id4基因的高甲基化状态,使Id4 mRNA重新表达.③Raji细胞Id4基因呈高甲基化状态是其恶性增殖的原因之一.
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