【摘 要】
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目的:探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠Kupffer细胞核因子κB(NF-κB) p65和IκB激酶β(IKKβ) mRNA及蛋白表达的影响.方法:采用高脂饲料喂养复制大鼠NASH模
【机 构】
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暨南大学附属第一医院,暨南大学医学院中医系,暨南大学医学院组胚系再生医学教育部重点实验室 ,暨南大学医学院病理生理学系、国家中医药管理局病理生理三级实验室
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目的:探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠Kupffer细胞核因子κB(NF-κB) p65和IκB激酶β(IKKβ) mRNA及蛋白表达的影响.方法:采用高脂饲料喂养复制大鼠NASH模型,在施以造模因素的同时分别灌服疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(参苓白术散)和综合方(柴胡疏肝散和参苓白术散的合方)的高、低剂量进行干预,16周后分离Kupffer细胞,Typan blue染色和流式细胞术(FCM)分别对Kupffer细胞进行活性和纯度鉴定；实时定量PCR法检测Kupffer细胞IKKβ和NF-κB p65 mRNA的表达水平；Western blotting法检测Kupffer细胞IKKβ、p-IKKβ和NF-κB p65蛋白水平.结果:每只大鼠获得纯化的Kupffer细胞(1.5～2.0) ×107,Typan blue染色显示这些细胞活力均在95％以上,FCM检测纯度均在90％以上；与正常组比较,模型组Kupffer细胞IKKβ mR-NA及蛋白的表达水平均明显升高(P＜0 01)；与模型组比较,高剂量综合方、健脾方和疏肝方组IKKβ mRNA的表达水平下调明显(P＜0.01或P＜0.05)；IKKβ及磷酸化蛋白的表达水平以高剂量健脾方组下降最为显著(P＜0.01或P＜0.05)；与正常组比较,模型组Kupffer细胞NF-κB p65 mRNA及蛋白的表达水平均明显升高(P＜0.01),与模型组比较,NF-κB p65 mRNA的表达水平以综合方组及高剂量健脾方组下调明显(P＜0.05),NF-κBp65蛋白的表达水平以高剂量健脾方组下降最为显著(P＜0.01).结论:Kupffer细胞IKKβ、NF-κB p65 mRNA及IKKβ、p-IKKβ、NF-κB p65蛋白的高表达可能参与NASH的发病,抑制这些信号分子的表达可能是疏肝健脾方药抗NASH的重要机制之一.
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