【摘 要】
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用纯化的H9N2亚型猪流感可溶重组NP蛋白作为包被抗原，建立了检测猪流感抗体的间接ELISA方法。ELISA的最佳工作条件是：抗原包被浓度为12．5μg／mL，37℃ 1h，4℃过夜；血清稀释度为1：40；酶
【机 构】
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浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,山东农业大学动科院
【基金项目】
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浙江省科技计划重点项目(2004C22044)
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用纯化的H9N2亚型猪流感可溶重组NP蛋白作为包被抗原，建立了检测猪流感抗体的间接ELISA方法。ELISA的最佳工作条件是：抗原包被浓度为12．5μg／mL，37℃ 1h，4℃过夜；血清稀释度为1：40；酶标SPA稀释度为1：10000，37℃温育40min，底物显色37℃ 15min。经重复性试验、交叉试验、竞争抑制试验等试验，结果表明该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。利用TG-ROC软件确定了自制ELISA（NP-ELISA）酶标板的临界值为0．20，特异性和敏感性分别为95．83％和91．43％
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