【摘 要】
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基于镰孢菌ITS序列,设计一对应用于实时荧光定量PCR（Real-Time QPCR）反应的镰孢菌属特异性引物TS和TR,并建立了相应的Real-Time QPCR体系。应用该反应体系,绝对定量了无肥（NF）、
【机 构】
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中国科学院东北地理与农业生态研究所,大豆生物学教育部重点实验室,中国科学院研究生院,CropGeneticsResearchUnit（CGRU）
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基于镰孢菌ITS序列,设计一对应用于实时荧光定量PCR（Real-Time QPCR）反应的镰孢菌属特异性引物TS和TR,并建立了相应的Real-Time QPCR体系。应用该反应体系,绝对定量了无肥（NF）、化肥（NP）以及化肥配施有机肥（NPM）等3种施肥措施下大豆田土壤镰孢菌DNA含量。结果表明：引物TS和TR对镰孢菌属真菌有较好的特异性;Real-Time QPCR反应的扩增曲线中各梯度浓度标准品的循环阈值（Ct值）间隔均匀,熔点曲线无杂峰,标准曲线的相关系数R2=0.993,斜率为-0.2927
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