目的 构建针对FMNL2基因的shRNA表达载体,以用于后续的功能学实验,并观察其对SW620细胞增殖的影响.方法 依据设计shRNA的原则,针对人FMNL2的mRNA序列,设计并合成编码的shRNA的两条寡核苷酸序列,构建重组质粒PGenesil-FMNL21和PGenesil-FMNL22,并设阴性对照PGenesil-HK.转染重组质粒至SW620中,转染48h后荧光显微镜下观察转染率,应用荧光定量PCR法检测PGenesil-FMNL21和PGenesil-FMNL22的瞬时干扰效果;应用MTT法检测转染48h和72h后对SW620增殖活性的影响.结果 酶切及测序证实重组质粒构建成功;转染48h荧光显微镜观察转染率:PGenesil-FMNL21为(60.8±2.8)%,PGenesil-FMNL22为(58.7±2.9)%,PGenesil-HK为(62.6±1.7)%,三者之间差异无统计学意义(P＞0.05);PGenesil-FMNL21对FMNL2基因的抑制效率最高为77.1%;转染12、24、48、72、96h后PGenesil-FMNL21对FMNL2的抑制率分别为13.5%、57.3%、80.3%、62.4%、33.2%;MTT检测在转染48 h和72 h后,实验组细胞的增殖活性小于对照组细胞的增殖活性(P＜0.05).结论 PGenesil-FMNL21和PGenesil-FMNL22均有沉默FMNL2基因的作用,其中PGenesil-FMNL21的沉默作用最大;FMNL2可能对促进细胞的增殖有一定的作用。