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目的：构建丙型肝炎病毒（HCV）非结构基因NS3的真核表达载体,并分析其在HeLa细胞中的表达。方法：以HCV全长cDNA质粒为模板进行PCR扩增,获得全长NS3基因,将其插入克隆载体pMD18-T中,鉴定后与真核表达载体pcDNA3.1（＋）重组,用脂质体介导法转染HeLa细胞,间接免疫荧光法及Western blot鉴定转染后HCVNS3蛋白的表达。结果：PCR扩增的NS3序列正确,构建的真核表达载体成功转染HeLa细胞,表达的NS3蛋白相对分子量为70kD。结论：成功构建了真核表达载体pcDNA3.